Molekulare Plattform für die Pathogendetektion
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- Benedikt Neumann
- vor 5 Jahren
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1 Molekulare Plattform für die Pathogendetektion Größere Präzision Schnellere Resultate Minimale Investition NEO 35/03-01/16 NEO 35/04-03/16 ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
2 Was ist ANSR? Die Lebensmittelindustrie hat einen Bedarf an schnellen, einfachen und präzisen Pathogentestverfahren, um die Chancen zu verringeren, dass kontaminierte Lebensmittel zu den Kunden gelangen. Im Gegensatz zu anderen molekularen Technologien nutzt ANSR (Amplified Nucleic Single-Temperature Reaction) eine zum Patent angemeldete, einzigartige Vervielfältigungsreaktionstechnologie für in-vitro DNA Vervielfältigung bei einer konstanten Temperatur. ANSR ermöglicht die Detektion von spezifischen Zielorganismen bei bereits geringeren Kontaminationswerten ab 10 Minuten nach der Anreicherung. ANSRs Anreicherung und Assay werden im Vergleich zu konventiellen Methoden nur minimal von der Probenmatrix beeinflusst. Wie funktioniert ANSR? Isothermale DNA Vervielfältigung und fluoreszente Detektion Pathogen Ziel-DNA oder -RNA wird mittels Lyse aus der angereicherten Probe freigesetzt. Eine spezielle Hybridisierungssonde ist Teil der ANSR Reagenzmischung. Wenn die lysierte Probe zu den ANSR Reagenzien zugegeben wird, bindet sich ein spezifischer Primer an eine spezifische Region der Erreger-DNA und startet den Amplifikationsprozess. Millionen Kopien der Zielpathogen-DNA werden hergestellt. Vervielfältigte Abschnitte der Pathogen-DNA binden sich an spezielle Hybridisierungssonden. Die Hybridisierungssonden fluoreszieren wenn sie an die DNA des Pathogens gebunden sind. Dies wird von dem ANSR Lesegerät detektiert. VERVIELFÄLTIGUNG UND DETEKTION KONTINUIERLICHE UND SCHNELLE RESULTATE SCHNELLERE DETEKTIONSZEIT
3 Vorteile NEUE TECHNOLOGIE Ermöglichung einer präzisen, auf DNA basierenden Detektion und Beseitung vieler Einschränkungen anderer Technologien GRÖSSERE PRÄZISION Genetische Wertunterscheidungen von speziellen Organismen bei 10 4 und 10 2 KbE/ml SCHNELLERE RESULTATE Resultate in so wenig wie 24 Stunden MINIMALE INVESTITION Niedrige Erstinvestition mit geringen Betriebskosten MINIMALER PLATZVERBRAUCH ANSRs kompakte Größe vereinfacht die Aufstellung und Inbetriebnahme im Labor Produkte und Validierungen ANSR Salmonella 10 Validierungen: Salmonella AOAC-PTM Std * * Je nach Rohstoff 1 KbE PRO PROBE ANSR Listeria spp. 18 POOLING VERFAHREN VERFÜGBAR Validierungen: Listeria spp. AOAC-PTM NF Validation NEO 35/03-01/16 ANSR Listeria Monocytogenes ANSR E.coli 0157:H ±2 Std 10 25±3 Std Std * * Je nach Rohstoff Validierungen: Listeria monocytogenes AOAC-PTM NF Validation NEO 35/04-03/16 Validierungen: E.coli 0157:H7 AOAC-PTM
4 Erläuterung des Nass - Poolings Als Pooling wird das Verfahren bezeichnet, unterschiedliche Proben miteinander zu kombinieren und als eine Probe zu testen. Vorteile VERFÜGBAR FÜR LISTERIA SPP. Nass-Pooling ermöglicht es, Proben von unterschiedlichen Matrizen miteinander zu kombinieren. Anschließend können die kombinierten Proben auf die Anwesenheit von allen Listeria Arten gescreent werden. Abhängig von der positiven Quote des Labors können bis zu 10 Proben in einem Assay getestet werden. Nass-Pooling verringert die Zeit, die für die Verarbeitung von einer großen Probenanzahl notwendig ist, und verringert gleichzeitig die Kosten. Bitte lesen Sie sich die Gebrauchsanweisung vollständig durch, bevor Sie den Test durchführen. 1. Entnehmen Sie eine geringe Menge von jeder Probe Verdünnen Sie jede Probe 1:10 und inkubieren Sie diese Pipettieren Sie 1 ml von bis zu 10 angereicherten Proben in ein 10 ml Röhrchen und vortexen Sie kurz. 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml = Bis zu 10 ml 4. Folgen Sie dem Assayverfahren.
5 Proben Testverfahren Bitte Lesen Sie sich die Gebrauchsanweisung vollständig durch, bevor Sie den Test durchführen. Einzel-Proben Pooling-Proben 1A. Nach der Anreicherung für das Testen von Einzelproben, transferieren Sie 50 µl der angereicherten Probe in die Clusterröhrchen und folgen Sie dem Assayablauf. 1B. Nach der Anreicherung für das Testen von Pooling-Proben, pipettieren Sie 1 ml von bis zu 10 angereicherten Proben in ein 10 ml Röhrchen. Vortexen Sie kurz. Transferieren Sie 50 µl der angereicherten Pooling-Probe in ein Clusterröhrchen und folgen Sie dem Assayablauf. Momentan erhältlich für Listeria spp. 2. Fügen Sie 450 µl Lysisreagenslösung zu der Probe hinzu. 3. Transferieren Sie die Probenröhrchen in den 37 C warmen Heizblock und inkubieren Sie für 10 Minuten. Transferieren Sie die Probenröhrchen in den 80 C warmen Heizblock und inkubieren Sie für 20 Minuten. 4. Transferieren Sie 50 µl der lysierten Probe in vorgeheizte, lyophilisierte Reagenzien (56 C) in dem Lesegrät. 5. Verschließen Sie die Röhrchen und vortexen Sie kurz. 6. Stecken Sie die Röhrchen zurück in das Lesegerät. Schließen Sie den Deckel und klicken Sie START in der ANSR Software, um das Assay zu starten. 7. Resultate werden als positiv, negativ oder ungültig angezeigt.
6 Neogen ist seit 1996 ein Marktführer in der Detektion von lebensmittelrelevanten pathogenen Bakterien. ANSR ist eine molekulare Plattform für die Pathogendetektion, die unterstützt wird von unserem unübertroffenem technischen Support Team und jahrelanger Erfahrung in Genomik und Lebensmittelsicherheitsdiagnostik. FRAGEN SIE NACH KOSTENLOSEN AUSTESTUNGEN The Dairy School, Auchincruive, Ayr, KA6 5HU, Scotland, UK Tel: oder Fax: oder Neogen Corporation, Neogen and ANSR are registered trademarks of Neogen Corporation, Lansing, Michigan NE8564
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