BVDV Vergleichende serologische Untersuchungen unter besonderer Berücksichtigung der Impfung

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1 BVDV Vergleichende serologische Untersuchungen unter besonderer Berücksichtigung der Impfung Michaela Alex 1, Georg Wolf 2, Klaus Teich 3, Armin Gangl 1 und Jens Böttcher 1 1 Zentralinstitut des Tiergesundheitsdienstes Bayern e.v., Poing 2 Institut für med. Mikrobiologie, Infektions- und Seuchenmedizin der Tierärztlichen Fakultät der LMU, München 3 VIRBAC Tierarzneimittel GmbH, Bad Oldeslohe Hersteller der verwendeten Testsysteme Bommeli, Bern Cedi-Diagnostics B.V., Lelystad Idexx, Wörrstadt Pourquier, Montpellier Svanova, Uppsala Synbiotics, Hallbergmoos

2 Untersuchte Seren Verlaufsseren von PI-Tieren mit maternalen Antikörpern (n = 86) Verlaufsseren von infizierten Tieren- BVDV-Genotyp 1a, 1c und 2 (n = 155) Seren von vakzinierten Tieren (n = 114) Feldseren aus einem Bestand, in dem BVDV-Genotyp 2 nachgewiesen wurde (n = 72) Verlaufsseren von Tieren, die Kontakt zu PI-Tieren hatten (n = 3) Überblick der ELISA-Ergebnisse von 455 Seren Testformat neg ELISA-Bewertung gbw pos % gbw/pos Ind. ELISA Ind. ELISA )* Ind. ELISA Komp. ELISA Komp. ELISA Komp. ELISA )** )* schwach positiv wurde als grenzbereichswertig (gbw) eingestuft )** eine gbw -Bewertung ist nicht vorgesehen

3 Übereinstimmung der Ergebnisse Ermittlung der Punktwerte Anzahl der Seren 1,,5 1, 1,5 2, 2,5 3, 3,5 4, 4,5 5, 5,5 6, Punktwerte Die Untersuchung von 331 Seren (73 %) führte zu übereinstimmenden Ergebnissen. Spezifitäten und Sensitivitäten Testformat Spezifität (%) SNT* < 2 SNT > 2 Sensitivität (%) 2 < SNT < SNT > SNT > Ind. ELISA Ind. ELISA Ind. ELISA Komp. ELISA Komp. ELISA Komp. ELISA Anzahl SNT* = Serumneutralisationstest

4 von PI-Tieren BVDV-CR43 PI-Tiere Indirekter ELISA 2 %-Wert rel. zu Positivkontrolle Tage p.n. Ag Be Ch Da Ed Fi Gi Ha Ik Ju Ka von PI-Tieren BVDV-CR43 PI-Tiere Kompetitiver ELISA 3 % Inhibition Tage p.n. Ag Be Ch Da Ed Fi Gi Ha Ik Ju Ka

5 von PI-Tieren BVDV-CR43 - PI-Tiere BVDV-Antikörper: Ind. ELISA 2 BVDV-Antikörper: Komp. ELISA 3 BVDV-CR43 - PI-Tiere BVDV-Antikörper ind. ELISA BVDV-CR43 - PI-Tiere NS2/3-Antikörper blocking-elisa %-Wert rel. zu Positivkontrolle 15% 13% 11% 9% 7% 5% 3% 1% -1% Tage p.n. A33 B32 C D39 E46 F35 G H28 I36 K15 J~4 % Inhibition (ELISA) % % % % % % -% Tag p.n. A172 B5 C1 D195 E185 F G8 H188 I J67 K149 von infizierten Tieren BVDV-Typ 1a SE115 BVDV-Antikörper: Indirekter ELISA 3 BVDV-Typ 1c PT81 BVDV-Antikörper: Indirekter ELISA 3 %-Wert rel. zur Positivkontrolle C693 C663 C695 C683 C658 C668 %-Wert rel. zur Positivkontrolle G979 J549 H3 I 65 %-Wert rel. zur Positivkontrolle BVDV-Typ 2 CS8644 BVDV-Antikörper: Indirekter ELISA B742 B741 B443 B745 B32 B743 B435 B438

6 von infizierten Tieren BVDV-Typ 1a SE115 BVDV-Antikörper: Komp. ELISA 3 BVDV-Typ 1c PT81 BVDV-Antikörper: Komp. ELISA 3 C693 % Inhibition C663 C695 C683 C658 C668 % Inhibition G979 J549 H3 I BVDV-Typ 2 CS8644 BVDV-Antikörper: Komp. ELISA % Inhibition B742 B741 B443 B745 B32 B743 B435 B von infizierten Tieren Zeitpunkt der 5 %-igen Serokonversion BVDV Typ 1a Typ 1c Typ 2 Ind. ELISA 1 Ind. ELISA 2 Ind. ELISA 3 Komp. ELISA 1 Komp. ELISA 2 Komp. ELISA 3 neg gbw pos neg gbw pos neg gbw pos neg gbw pos neg gbw pos neg gbw pos

7 von mit Totimpfstoff geimpften Tieren Impfschemata Tierzahl Tag Tag 21 Tag 42 Tag 126 Tag 182 Tag Serologie Serologie Serologie Serologie (Virbac) = inaktivierter BVDV-1a Stamm Kyle 3 (Intervet) = inaktivierter BVDV-1a Stamm C86 von mit Totimpfstoff geimpften Tieren Prozentsatz pos/gbw- Bewertung Tag )* Tag 42 Tag 126 Tag 196 Ind. ELISA Ind. ELISA Ind. ELISA Komp. ELISA Komp. ELISA 2 25)** Komp. ELISA Tierzahl )* gbw-reaktionen mit Ausnahme von Test Komp. ELISA 3, hier pos (gbw nicht vorgesehen) )** ein Serum reagierte ebenfalls in 3 weiteren Tests

8 von mit Totimpfstoff/Lebendimpfstoff geimpften Tieren Impfschemata Tierzahl Tag Tag 21 Tag 42 8 Vacoviron 8 Mucobovin Vacoviron Serologie Serologie (Virbac) = inaktivierter BVDV-1a Stamm Kyle 3 Mucobovin (Merial) = inaktivierter BVDV-1c Stamm New York 1 und Border-Disease-Stamm Aveyronite Vacoviron (Merial) = attenuierter BVDV-1a Stamm Oregon C24V von mit Totimpfstoff/Lebendimpfstoff geimpften Tieren Prozentsatz pos/gbw-bewertung Tag )* Tag 42 ungeimpft Tag 42 geimpft Ind. ELISA 1 9)** 94 Ind. ELISA 2 Ind. ELISA 3 Komp. ELISA 1 81 Komp. ELISA 2 81 Komp. ELISA 3 Tierzahl 23 7 )* am Tag ergab die Untersuchung im Serumneutralisationstest für alle Seren ein negatives Ergebnis )** 2 Seren reagierten grenzwertig

9 Differenzierung von infizierten und vakzinierten Tieren über die Reaktionsstärke der BVDV-Antikörper im ELISA? %-Wert relativ zur Positivkontrolle bzw. % Inhibition 1 42 Tage p.v Indirekte ELISA Kompetitive ELISA Differenzierung von infizieten und vakzinierten Tieren über die Reaktionsstärke der BVDV-Antikörper im ELISA? %-Wert relativ zur Positivkontrolle bzw. % Inhibition 1 42 Tage p.v Tage p.v Indirekte ELISA Kompetitive ELISA

10 Differenzierung von infizierten und vakzinierten Tieren über die Reaktionsstärke der BVDV-Antikörper im ELISA? %-Wert relativ zur Positivkontrolle bzw. % Inhibition 1 42 Tage p.v Tage p.v. Feldinfektion Indirekte ELISA Kompetitive ELISA Zusammenfassung Alle Testsysteme zeigten ähnliche Spezifitäten und Sensitivitäten Alle Testsysteme wiesen Schwächen bei der Untersuchung von Seren mit SNT-Titern < auf Reaktionsstärken im ELISA erlauben keine Differenzierung zwischen Impfung oder Infektion des Tieres Diagnostische Zielsetzung ist entscheidend für die Wahl des zu verwendenden ELISAs Jungtierfenster-Untersuchung / Nachweis maternaler Antikörper Nachweis von Impfantikörpern frühzeitige Nachweis von Antikörpern (Markt, Export) Preis / Handhabung

11 Danksagung Frau Kathrin Wolff danken wir für Ihre Mitarbeit bei der Durchführung der Untersuchungen!