MPP Multiplex 2x PCR-Mastermix

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Transkript:

Datenblatt Artikel-Nr. BS91.522.0250 250 Reaktionen in 20µl Artikel-Nr. BS91.522.1250 1250 Reaktionen a 20µl (Nur für Forschung und in vitro-anwendungen) Chargen-Nr.: Mindestens haltbar bis: Aussehen: Farbe: 1

Beschreibung MPP Multiplex PCR-Mastermix zur Durchführung von Multiplex PCR Reaktionen in nur einem Ansatz schnell, spezifisch, ready to use. Der Mastermix enthält eine optimale Zusammenstellung aus Polymerase, Nukleotiden, MgCl 2 sowie stabilisierenden Komponenten in einem speziell entwickelten Puffersystem. Dies erlaubt die parallele Amplifikation einer Vielzahl von Fragmenten in nur einem einzigen PCR-Assay. Der Mastermix enthält alle Reagenzien (außer Primer und Template-DNA) in einer 2x konzentrierten ready to use Lösung. Das Kit wird empfohlen für Routine PCR Assays und ist optimal geeignet zur Synthese von multiplen Zielgen Amplifikationen in nur einem Reaktionsgefäß. Die hohe Spezifität und Sensitivität des Mastermixes wird durch die optimierte Hot Start Polymerase erreicht. Ihre Aktivität ist bei Raumtemperatur inhibiert, dies verhindert die Extension von unspezifisch gebundenen Primern und der Primer-Dimer-Bildungen bei niedrigen Temperaturen während dem PCR-set-up. Zusammensetzung Multiplex PCR-Mastermix ( roter Deckel) 2x konzentrierter Mastermix; beinhaltet die Hot Start Taq Polymerase, Nukleotide, optimierten Reaktionspuffer, Stabilisierer PCR Wasser ( weißer Deckel) 2

Empfohlenes PCR-Protokoll Die Herstellung eines Mastermixes mit allen Komponenten (außer der Template-DNA) wird empfohlen um Pipettierfehler zu vermeiden. Ein Reaktionsvolumen zwischen 20-50 µl pro Ansatz ist für die meisten PCR Maschinen geeignet. Das Pipettieren mit sterilen Filterspitzen und in einer Umgebung frei von DNA- Extraktionen und DNA-Analysen wird empfohlen. Kontrollen ohne Template-DNA sollten für jede Amplifikation mitgeführt werden. Komponente Konzentration der Stammlösung Konzentration im Ansatz MPP Multiplex PCR 2x 1x 25 μl Mastermix forward primer 1 10 μm 400 nm 2 μl reverse primer 1 10 μm 400 nm 2 μl forward primer 2 10 μm 400 nm 2 μl reverse primer 2 10 μm 400 nm 2 μl forward primer 10 μm 400 nm 2 μl reverse primer 10 μm 400 nm 2 μl 50 μl Ansatz Template-DNA: tierisch genomische DNA bakteriell genomische DNA - Plasmid und lambda DNA PCR-Wasser 10-200 ng 1-50 ng 1-5 ng x μl auf 50 μl auffüllen 3

Empfohlenes PCR-Programm Zyklusschritt Temperatur Zeit Anzahl der Zyklen Initiale 95 C 12 min 1x Denaturierung Denaturierung 95 C 30 sek 30-50x Annealing 58-64 C 40 sek Elongation 72 C 1 min/kb Finale Elongation 72 C 5 min 1x 4

Technische Daten Versand: Lagerung: bei Raumtemperatur bei -20 C (Bitte vermeiden Sie häufiges Auftauen und Einfrieren) 12 Monate haltbar Lagerung bei 4 C für bis zu 3 Monate möglich Sicherheitshinweis: Dieses Produkt sollte nur von Personen verwendet werden, die Routine in Laboranwendungen haben. Es sollte laborübliche Schutzkleidung wie Kittel, Handschuhe und Schutzbrillen getragen werden. Bei Kontakt mit Haut und Augen sollten die betroffenen Stellen umgehend mit Wasser gewaschen bzw. ausgespült werden. Anwendungshinweis: In bestimmten Ländern sind einige Anwendungen, für die dieses Produkt eingesetzt werden kann, patentrechtlich geschützt. Da durch den Kauf keine Lizenzen erworben werden, kann abhängig vom Anwendungsland und der Anwendung der Erwerb entsprechender Lizenzrechte erforderlich sein. 5

Notizen 6

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