Möglichkeiten und Grenzen von Nachweismethoden

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1 MNA-Konzepte - Grundlagen & Vorgehensweise - Untersuchung und harakterisierung von Schadstofffahnen Möglichkeiten und Grenzen von Nachweismethoden Dr. Kathrin R. Schmidt, TZW-DVGW Bundesweite Fortbildung für Bodenschutzbehörden sowie für interessierte Sachverständige und Pflichtige LABO Förderprojekt B 4.13 des Länderfinanzierungsprogramms Wasser, Boden und Abfall

2 NATURAL ATTENUATION (NA) Schadensherde Industriestandort Ablagerung Wasserwerk Rezeptor ungesättigte Bodenzone Grundwasser- Fließrichtung LNAPL DNAPL (LKW) Schadstofffahne Aquifer gesättigte Bodenzone Aquitard Natürliche Schadstoffminderungsprozesse sind biologische, chemische und physikalische Prozesse, die ohne menschliches Eingreifen zu einer Verringerung ( ) eines Stoffes im Boden oder Grundwasser führen Der biologische Abbau ist bei vielen Grundwasserschäden der maßgebende frachtreduzierende Prozess.

3 MIKROBIELLER ABBAU VON HLORETHENEN Anaerob-reduktiver Abbau je mehr hloratome desto leichter abbaubar Auxiliarsubstrate H 2 l l l l H l H H l = l H = l H = l H = l PE TE cde V Aerob-oxidativer Abbau je weniger hloratome desto leichter abbaubar O 2 l - H 2 O H H Ethen = H H Auxiliarsubstrate hlorethene (Elektronen-Donoren) (Elektronen-Akzeptoren) werden oxidiert werden reduziert O 2 hlorethene (Elektronen-Donoren) werden oxidiert Sauerstoff (Elektronen-Akzeptor) wird reduziert

4 MIKROBIELLER ABBAU VON AROMATEN (AKW) S H 3 H 3 O 2 O O 2 H 2 O -25,4 H 3 Aromaten (Elektronen-Donoren) werden oxidiert Sauerstoff (Elektronen-Akzeptor) wird reduziert Energiegewinn am Beispiel Naphtalin (kcal/eeq) Alternative Elektronen-Akzeptoren: NO 3 N 2-23,9 Fe(III) Fe(II) -5,7 SO 4 S 2- -1,7 O 2 H 4-1,0

5 OFFENE FRAGEN VOR ANWENDUNG VON MNA Industriestandort Wasserwerk Rezeptor Schadensherde Grundwasser- Fließrichtung LNAPL Ablagerung DNAPL (LKW) Welche Abbauprozesse sind???? Schadstofffahne im Untergrund wirksam? ungesättigte Bodenzone Aquifer gesättigte Bodenzone Aquitard welche Schadstoffe werden abgebaut? welche Milieubedingungen sind erforderlich? wie effizient ist der Abbau? ist MNA ausreichend? (Zeitskala, Einhalten von Grenzwerten, Toxizitätsreduktion etc.)

6 NAHWEISMETHODEN Schadstoffmuster PE TE cde V Ethen Redoxmilieu Aerob/ anaerob Molekularbiologischer Nachweis (PR) Keimzahl-Bestimmung (MPN) A B D E F G H Mikrobiologische Abbauversuche Isotopenuntersuchung Abbau schneller 13 Abbau langsamer

7 STANDORT 1: FRANKENTHAL, RHEINLAND-PFALZ Schadstoffe: hlorethene Verursacher: Metallverarbeitender Betrieb und chemische Reinigung Flächige Schadstofffahne in der Innenstadt Bislang P&T am Herd und MNA in der Fahne

8 SHADSTOFFMUSTER Schadstoffmuster am Standort gibt Hinweise auf Abbauvorgänge Abbau wird u.a. deutlich durch: die Detektion spezifischer Metabolite im Abstrom PE TE cde V Ethen sowie kürzere Fahnenlängen für gut abbaubare und hydrophile (weniger Retardation) als für schlecht abbaubare und hydrophobe Substanzen Naphthalin Acenapthen 31 mg/l 3,6 mg/l Wasserlöslichkeit

9 SHADSTOFFMUSTER: KW-STANDORT PE > 100 µg/l TE > 100 µg/l cde > 100 µg/l V > 100 µg/l Metabolite der anaerob-reduktiven Dechlorierung: cde ist Hauptkontaminant wenig V relativ kurze Fahne 0 m 200 m 400 m 600 m 800 m 1000 m 00 m 1400 m

10 REDOXMILIEU Hydrochemische Standort-Bedingungen grenzen mögliche Abbauprozesse ein Redoxmilieu: Bewertung von Elektronen-Akzeptoren (Sauerstoff, Nitrat, Eisen(III), Mangan(IV), Sulfat) und/ oder Respirationsprodukten (Nitrit, Eisen(II), Mangan(II), Sulfid, Methan) Informationen über die Verfügbarkeit von Auxiliarsubstraten, Nährstoffen O 2 H 2 O NO 3 N 2 Fe(III) Fe(II) Mn(IV) Mn(II) SO 4 S 2- O 2 H 4

11 REDOXMILIEU: KW-STANDORT PE > 100 µg/l TE > 100 µg/l cde > 100 µg/l V > 100 µg/l 0 m 200 m 400 m 600 m 800 m 1000 m 00 m 1400 m In verschiedenen Fahnenbereichen (lateral und vertikal) liegen für unterschiedliche Abbauprozesse geeignete Bedingungen vor

12 Abbildung von MIKROBIOLOGISHE BESTANDSAUFNAHME (PR) Nachweis von bestimmten Mikroorganismen in Feldproben (Grundwasser, Boden) PR (Polymerase hain Reaction): Molekularbiologischer Nachweis der DNA (= Erbgutinformation) Schadstoff-abbauende Bakterien/ Enzyme liefern Informationen zum Abbaupotential Redox-aktive Bakterien/ Enzyme und hydrochemische Daten ermöglichen Beurteilung des Redoxmilieus

13 PR-METHODE: KW-STANDORT PE TE cde Desulfomonile sp. Desulfuromonas sp. Dehalobacter sp. V Ethen Dehalococcoides sp. PE > 100 µg/l TE > 100 µg/l cde > 100 µg/l V > 100 µg/l 0 m 200 m 400 m 600 m 800 m 1000 m 00 m 1400 m Korrelation von PR-Nachweis, Schadstoffmuster und Redoxmilieu

14 MIKROBIOLOGISHE BESTANDSAUFNAHME (MPN) Nachweis von Mikroorganismen-Gruppen mit bestimmten Leistungen in Feldproben (Grundwasser, Boden) MPN (Most Probable Number): Wachstum und Keimzahl-Bestimmung im Labor (Kulturverfahren) A B D E F G H Schadstoff-abbauende Bakteriengruppen liefern Informationen zum Abbaupotential Redox-aktive Gruppen und hydrochemische Daten ermöglichen Beurteilung des Redoxmilieus

15 Keime / g Trockensubstanz < 6,7 < 6,7 < 6,7 MPN-METHODE: KW-STANDORT 1,E+06 1,E+05 1,E+04 Nitrat-Reduzierer Sulfat-Reduzierer Eisen-Reduzierer aerobe V-Verwerter 1,E+03 1,E+02 1,E+01 1,E F 44 F 45 F 46 F Messstellen Aerobe V-Verwerter sind weit verbreitet Sulfat-Reduktion von untergeordneter Bedeutung gegenüber Nitrat- und Eisen-Reduktion

16 MIKROBIOLOGISHE ABBAUVERSUHE Nachweis am Standort auftretender mikrobiologischer Abbauprozesse Standortmaterial (Grundwasser, Sediment) Labor-Mikrokosmen oder in-situ (Bactraps) Standort-nahe oder gezielt veränderte Bedingungen Untersuchung von Schadstoffabbau und Redoxprozessen

17 hlorethene, hlorid [µm] ABBAUVERSUHE: KW-STANDORT anaerob-reduktiv aerob-oxidativ l l PE Zeit [Tage] l = l l l TE Metabolitenbildung unter anaeroben Bedingungen: Stoffmengenerhaltung: aus ca. 27 µmol PE (4,3 mg) werden ca. 27 µmol cde (2,6 mg) H = l cde H H l = l 0 hlorid cde TE PE cde H H l Zeit [Tage] = l 2 O l - + H 2 O Mineralisierung unter aeroben Bedingungen sequentiell anaerob-aerobe Schadstoff-Elimination

18 Abbildung von ISOTOPENUNTERSUHUNG Nachweis mikrobiologischer NA-Prozesse am Standort mittels chemischer Analytik Quellen- und Verursacherzuordnung Quantifizierung des biologischen Abbaus Isotope = Atome desselben Elements mit unterschiedlicher Anzahl an Neutronen, z.b. (leicht) und 13 (schwer), beide stabil, d.h. nicht radioaktiv

19 ISOTOPEN: MIKROBIOLOGISHE FRAKTIONIERUNG l l l = PE = 13 l l l l l l = TE = 13 H l H leichtes Kohlenstoffisotop schnellere Umsetzung schweres Kohlenstoffisotop 13 l l l l langsamere Umsetzung Bakterien verwerten bevorzugt die leichten Isotope Anreicherung der schweren Isotope in verbleibenden Schadstoff Veränderung der Isotopenverhältnisse = Isotopenfraktionierung

20 ISOTOPEN: MIKROBIOLOGISHE FRAKTIONIERUNG und Ausgangsschadstoff mit spezifischem Isotopenverhältnis Bakterien setzen schneller um als 13 gebildete Verbindung abgereichert an 13 verbleibende Substanz angereichert an 13 leichter schwerer Isotopensignatur = Verhältnis von schweren zu leichten Isotopen in Bezug zu einem Standard (δ-notation) 13 / natürliches Verhältnis ca. 1 : H/ 1 H natürliches Verhältnis ca. 1 :

21 Isotopen-Signatur ISOTOPEN: ANREIHERUNGSFAKTOREN ε = - 30 starke Fraktionierung ε = - 15 mittlere Fraktionierung ε = - 5 schwache Fraktionierung Isotopisch schwerer Isotopisch leichter % 75% 50% 25% 0% des Ausgangsschadstoff je höher die Anreicherungsfaktoren desto besser für Nachweis und Quantifizierung geeignet korrekte Quantifizierung nur mit richtigem Anreicherungsfaktor möglich

22 Konzentration Isotopen-Signatur ISOTOPEN: KW-STANDORT V mg/l V δ ,5-17,3-15, Zeit [Tage] ,9 PE > 100 µg/l TE > 100 µg/l cde > 100 µg/l V > 100 µg/l 0 m 200 m 400 m 600 m 800 m 1000 m 00 m 1400 m 13 -Isotopenanreicherung (Summensignaturen) im Feld Bestimmung von Anreicherungsfaktoren in Mikrokosmen Quantifizierung des Abbaus im Feld

23 BEWERTUNG DER METHODEN FÜR HLORETHENE METHODE AUSSAGEKRAFT GRENZEN Schadstoffmuster Redoxmilieu PR MPN Abbauversuche -Isotopen anaerob-reduktive Dechlorierung nachweisbar Information über die Randbedingungen des Abbaus Leitorganismen der anaerobreduktiven Dechlorierung nachweisbar aerobe V-Verwerter nachweisbar detaillierte harakterisierung des Schadstoff-Abbaus (Abbaureihenfolge, erforderliche Bedingungen etc.) ermöglicht chemischen Nachweis des Abbaus und Quantifizierung keine Information über aeroboxidativen Abbau durch Verwendung von integrierenden Mischproben Bewertung oft ungenau kein Aktivitätsnachweis Nachweis für aerob-oxidativen Abbau in der Entwicklung kein Nachweis für anaerob-reduktive Dechlorierung teilweise relativ lange Inkubationszeit relativ lange Zeitdauer, insbesondere anaerob keine ins Feld übertragbaren Abbauraten Interpretation der Ergebnisse teilweise anspruchsvoll

24 STANDORT 2: RÜSGES, NORDRHEIN-WESTFALEN Schadstoffe: PAK, BTEX, NSO-HET Verursacher: hemische Fabrik Schadstofffahne ausgehend von Werksgelände MNA-Konzept wird umgesetzt

25 SHADSTOFFMUSTER: AKW-STANDORT (PAK) gut abbaubares, hydrophiles Naphthalin nur am Fahnenbeginn nachweisbar schlecht abbaubares, hydrophobes Acenapthen reichert sich im Fahnenverlauf an

26 REDOXMILIEU: AKW-STANDORT aerob Sulfatreduzierend/ methanogen Fe(III)- reduzierend In verschiedenen Fahnenbereichen liegen für unterschiedliche Abbauprozesse geeignete Bedingungen vor

27 Aerobe Keime /ml Grundwasser < 6,7 < 6,7 MPN-METHODE: AKW-STANDORT 1,E+04 1,E+03 1,E+02 Gesamtkeimzahl (flacher Horizont) Gesamtkeimzahl (tiefer Horizont) AKW-Verwerter (flacher Horizont) AKW-Verwerter (tiefer Horizont) 1,E+01 1,E+00 Herd Abstrom Abstrom 60 m 130 m Höhere Keimzahlen im Herd als im Abstrom zeigen mikrobielle Aktivität bei Grundwasser- Belastung

28 NSO-HET PAK BTEX ABBAUVERSUHE: AKW-STANDORT Redoxzone Sulfatreduzierend Fe(III)-/Sulfatreduzierend aerob Ethylbenzol Benzol Naphthalin Acenaphthen Phenanthren Fluoren Dibenzofuran Benzothiophen Methylbenzofuran Dibenzothiophen arbazol Methyldibenzofuran Abbauaktivität hängt von Redoxbedingung ab +++ = Abbau innerhalb 50 Tage ++ = Abbau innerhalb 280 Tage, + = Abbau innerhalb 280 Tage, 20 - = kein eindeutiger Abbau

29 ISOTOPEN: AKW-STANDORT KE B7 [μg/l] δ 13 [ ] isopropylbenzol 14,4-20,9±0,9 Indan ,8±0,6 KE B8 [μg/l] δ 13 [ ] isopropylbenzol 3,2-19,5±0,7 Indan 15-18,5±0,5 GW 22 [μg/l] δ 13 [ ] isopropylbenzol 14,6-17,9±0,5 Indan 91-21,3±0,5 13 -Isotopen-Anreicherung im Feld qualitativer Nachweis des biologischen Abbaus

30 BEWERTUNG DER METHODEN FÜR AROMATEN METHODE AUSSAGEKRAFT GRENZEN Schadstoffmuster Redoxmilieu PR/ MPN Abbauversuche -Isotopen Abreicherung leichter abbaubarer Substanzen erkennbar Information über die Randbedingungen des Abbaus gibt Informationen zu Abbaupotential und Redoxmilieu detaillierte harakterisierung des Schadstoff- Abbaus ermöglicht chemischen Nachweis des Abbaus und ggf. Quantifizierung reiner Konzentrations-Rückgang gibt keinen Aufschluss über frachtreduzierende Prozesse durch Verwendung von integrierenden Mischproben Bewertung oft ungenau PR: kein Aktivitätsnachweis MPN: teilweise relativ lange Inkubationszeit relativ lange Zeitdauer, insbesondere anaerob keine ins Feld übertragbaren Abbauraten Interpretation der Ergebnisse teilweise anspruchsvoll PAK: aufgrund der Molekülgröße schwer anwendbar BTEX: aufgrund niedriger Anreicherungsfaktoren schwer anwendbar

31 HÄUFIGKEIT DER ANWENDUNG AM TZW PE TE cde V Ethen Aerob/ anaerob A B D E F G H METHODE Schadstoffmuster Redoxmilieu PR HLORETHENE 27 ausgewertete Praxisfälle bei allen Praxisfällen und Forschungsvorhaben bei allen Praxisfällen und Forschungsvorhaben bei 65% der Praxisfälle AROMATEN 21 ausgewertete Praxisfälle bei allen Praxisfällen und Forschungsvorhaben bei allen Praxisfällen und Forschungsvorhaben bei Forschungsvorhaben bereits angewandt MPN bei 45% der Praxisfälle bei 85% der Praxisfälle Abbauversuche -Isotopen bei 80% der Praxisfälle Daten-Basis am TZW nicht ausreichend bei 75% der Praxisfälle schnell 13 langsam Die Auswertung stellt eine Auswahl dar, da weitere Substanzklassen nicht berücksichtigt wurden. Stand: September 2013

32 BEWERTUNG DER VERSHIEDENEN ISOTOPE Isotope hlorethene PAK/ NSO-HET BTEX 13 / +++ +/ H/ 1 H 37 l/ 35 l + Entwicklungsbedarf + Entwicklungsbedarf Entwicklungsbedarf nicht anwendbar ++ Die gleichzeitige Betrachtung von zwei Isotopen (dual, 2D) liefert weitergehende Informationen. Isotopenmethoden ermöglichen die Unterscheidung frachtreduzierender von anderen NA-Prozessen sowie die Quantifizierung im Feld

33 ZUSAMMENFASSUNG Schadstoffmuster wichtige erste Hinweise, Daten liegen meistens vor Redoxmilieu wichtige Randbedingung, Daten liegen oft vor Mikrobiologische Bestandsaufnahme PR: schneller Nachweis mikrobieller Potentiale MPN: relativ schneller Nachweis mikrobieller Aktivitäten Abbauversuche (Mikrokosmen) liefern umfassende Kenntnisse des Abbauverhaltens Einzelfallbetrachtung: Je nach Komplexität eines Standortes werden Methoden für einen multiple-lines-ofevidence-approach ausgewählt. Isotopenfraktionierung ermöglicht Unterscheidung zwischen Frachtreduktion durch biologischen Abbau und anderen NA-Prozessen sowie Quantifizierung

34 ANWENDUNGSBEISPIELE AUS KORA Schadstoffverteilung Redox MPN PR Isotopen Abbauversuche Abbauschema Frankenthal Killisfeld Primärkontaminanten: PE und TE Primärkontaminanten: PE und TE Abbauprodukte: cde ist Hauptkontaminant, V Abbauprodukte: cde, V, Ethen Redoxpotential (mv): Redoxpotential (mv): Sauerstoff (mg/l): < 0,1 5,5 Sauerstoff (mg/l): < 0,1 2,6 Nitrat (mg/l): < 0,5 100 Nitrat (mg/l): < 0,5 46 Eisen (mg/l): < 0,01 5,9 Eisen (mg/l): < 0,01 8,5 Methan (µg/l): < Methan (µg/l): < aerobe V-Verwerter in 11 von Proben detektiert PE à cde halorespiratorische Organismen an mehreren Messstellen nachweisbar Dehalococcoides sp. (PE à V/Ethen) nur an BP46 nachweisbar Anaerob-reduktiv: PE/TE à cde (V) Aerob-oxidativ: V produktiv, cde cometabolisch mit V, cde produktiv Anreicherungsfaktoren in Abbauversuchen bestimmt Abbau am Standort quantifiziert sequentiell anaerob-aerob: PE/TE anaerob-reduktiv zu cde (V) cde (V) aerob-oxidativ zu O 2, H 2 O, l verschiedene anaerobe und aerobe Verwerter- Gruppen nachgewiesen Dehalococcoides sp. (PE à V/Ethen) an mehreren Messstellen nachweisbar Anaerob-reduktiv: PE/TE à Ethen Aerob-oxidativ: V produktiv, cde cometabolisch mit V Anreicherungsfaktoren in Abbauversuchen bestimmt sequentiell anaerob-aerob: PE/TE anaerob-reduktiv zu V/Ethen/Ethan V (cde) aerob-oxidativ zu O 2, H 2 O, l

35 PR: ZUR VERFÜGUNG STEHENDE METHODEN Parameter Qualitative PR (ja/nein Ergebnis) Quantitative PR (Genkopien/mL) Anaerob reduktiv dechlorierende Organismen PE Ethen: Dehalococcoides sp. PE cde: Desulfomonile, Desulfuromonas, Dehalobacter, Desulfitobacterium sp. Anaerob reduktiv dechlorierende Enzyme von Dehalococcoides PE TE (pcea), TE Ethen (tcea), cde Ethen (vcra), V Ethen (bvca) Redoxprozesse Nitrat-, Eisen-, Sulfat-Reduzierer, Methanogene, Acetogene, Anammox ( ) Aromaten abbauende Enzyme Naphthalin-Dioxygenase, Toluol-4-Monooxygenase ( ) ( )

36 PR DURHFÜHRUNG Wasserprobe Bakterien Membranfiltration Zell-Lyse DNA, Proteine, Zelltrümmer DNA Amplifizierte DNA DNA-Extraktion und Reinigung PR = Polymerase hain Reaction

37 picture taken from DNA = DESOXYRIBONULEINSÄURE DNA = Erbgutinformation aller Zellen Organismen-Nachweis anhand der DNA für Ribosomen (= Proteinbaustelle, in jeder Zelle enthalten) enthält hoch konservierte Regionen selbst nicht verwandte Arten haben die gleiche Sequenz und hoch variable Regionen jede Art hat eine einzigartige Sequenz Enzym-Nachweis anhand der DNA für Enzyme Information über genetisches Potential, aber nicht über aktuelle Aktivität

38 PR = POLYMERASE HAIN REATION 1 Auftrennung der doppelsträngigen DNA Polymerase Primer 2 Anlagerung der Primer 3 Vervollständigung der Einzelstränge zum Doppelstrang entstandene DNA-Stränge bilden die Vorlage für den nächsten Durchgang bei jedem Durchgang wird die DNA- Menge verdoppelt exponentielle Vervielfältigung

39 AUSWERTUNG EINER PR-REAKTION Gel-elektrophoretische Trennung des PR-Produkts in einem Agarose-Gel DNA ist negativ geladen wandert im elektrischen Feld zur Anode (Plus-Pol) das Agarose-Gel bildet ein Molekülsieb kleinere Fragmente wandern schneller Auftrennung der DNA-Fragmente nach ihrer Größe - + Start 2176 bp 1766 bp 30 bp 1030 bp 653 bp 517 bp 453 bp 394 bp 298 bp 220 bp 154 bp bp= Basenpaare

40 REAKTIONSSHEMA QUANTITATIVE PR Zugabe von Fluoreszenzfarbstoffen zur PR-Reaktion ungebunden wenig Fluoreszenz + Farbstoff Bindung an doppelsträngige DNA Fluoreszenz l Exponentielle Zunahme der Fluoreszenz mit exponentieller Vervielfältigung der DNA l l l l l Messung der zunehmenden Fluoreszenz als Maß für die DNA-Menge einer Probe l l

41 MPN: ZUR VERFÜGUNG STEHENDE METHODEN Parameter aerobe Schadstoffabbauer V-Verwerter PAK-Verwerter NSO-Heterozyklen-Verwerter BTEX-Verwerter aerobe Gesamtkeimzahl (GKZ) Redoxprozesse Nitrat-Reduzierer (anaerob: NO 3 N 2 ) Eisen-Reduzierer (anaerob: Fe(III) Fe(II)) Sulfat-Reduzierer (anaerob: SO 4 S 2- ) Methanogene (anaerob: O 2 H 4 ) Nitrifikanten (aerob: NH 4 NO 2 NO 3 ) Nitrat-Ammonifizierer (anaerob: NO 3 NO 2 NH 4 ) Quantitativ (Keime/mL)

42 MPN DURHFÜHRUNG Wasserprobe dekadische Verdünnungsreihe Inkubation in selektiven Nährmedien unter verschiedenen Bedingungen A B D E F G H Sterilkontrollen A B D E F G H Auszählung der bewachsenen Röhrchen Berechnung der Keimzahlen

43 VERGLEIH DER METHODEN PR UND MPN anwendbar auf Nachweis PR Grundwasser- und Bodenproben von spezifischen Bakterienarten mit bestimmter Abbauleistung Arten müssen bekannt und molekularbiologisch charakterisiert sein alle Abbauprozesse quantitativ MPN Grundwasser- und Bodenproben von Bakterien mit bestimmter Abbauleistung Arten müssen nicht bekannt sein nur produktive Abbauprozesse quantitativ Präsenz, keine Aktivität Aktivität unter Laborbedingungen Zeitbedarf 2 3 Tage 1 bis 6 Wochen

44 ABBAUVERSUHE DURHFÜHRUNG Wasserproben Befüllung der Gefäße direkt im Feld ggf. Zugabe von Sediment, Schadstoffen, Auxiliarsubstraten, Nährstoffen Inkubation unter relevanten Bedingungen Proben-Entnahme und Analytik auf Schadstoffabbau und Redoxchemie Bewertung des Standort-spezifischen Abbaupotentials

45 ISOTOPEN: ANREIHERUNGSFAKTOREN anaerob PE zu TE anaerob TE zu cde anaerob cde zu V anaerob V zu Ethen aerob TE zu O2 aerob cde zu O2 aerob V zu O2 unterschiedliche Faktoren für cde und V anaerob bzw. aerob anaerob Benzol anaerob Toluol anaerob Xylole aerob Benzol aerob Toluol aerob Xylole Anreicherungsfaktor ε [ ] Daten aus Aelion, 2010: Bestimmung von Standort-spezifischen Faktoren in Abbauversuchen empfehlenswert