Diagnostik an Blutzellen Was ist ein Blutbild? Was ist der Hämatokrit? Wie werden Zellen im Blut Untersucht? Marker zur Identifizierung von Zellen im Blut
Diagnostik an Blutzellen Blut Plasma (ca. 55%) Zellen (ca. 44%) Serum Fibrin (Gerinnung) Erythrozyten Leukozyten Thrombozyten ca. 25 Billionen ca. 70 Milliarden ca. 280 Milliarden Lymphozyten Granulozyten Monozyten ca. 12,5 Milliarden ca. 26,5 Milliarden ca. 2,5 Milliarden Eosinophile Neutrophile Basophile ca. 1 Milliarde ca. 25 Milliarden ca. 280 Millionen Stabkernige (junge Neutrophile) Segmentkernige Übersegmentkernige
Diagnostik an Blut-Zellen Methoden manuell, mikroskopish: Blutausstrich aus Seminarbeitrag Pathobiochemie SS2014
Diagnostik an Blut-Zellen Methoden manuell, mikroskopish: Osmotische Resistenzbestimmung erhöht: - Thalassämien und andere Hämoglobinopathien - schwere Eisenmangelanämien - chronische Lebererkrankungen vermindert: - Kugelzellanämie - erworbene hämolytische Anämien - Benzolvergiftung (Widerstansfähigkeit der Erythrozyten gegen hypotonen NaCl-Lösung) Reagenzröhrchen mit steigender Salzkonzentration (links nach rechts) norm: 0,46-0,42 % NaCl, beginnende Lyse; 0,34-0,30 % NaCl, vollständige Lyse aus Seminarbeitrag Pathobiochemie SS2013
Diagnostik an Blut-Zellen Methoden Durchflußzytometrie Impedanz, Widerstand: optisch: Stromfluss Strahlengang Detektion Kapillaröffnung Durchflusszelle Elektroden
Diagnostik an Blut-Zellen Methoden Durchflußzytometrie (optisch) Pufferstrom mit Probe (Zellen) sideward scatter 90 Detektoren Lichtquelle Strahlengang forward scatter
Diagnostik an Blut-Zellen Methoden Durchflußzytometrie (Fluoreszenz; FACS ) Lichtquellen Strahlengang *1) * 1) * 1) 90 * 1) * 2) * 2) forward scatter * 1) * 2) * 2) * 1) sideward scatter * 1) Detektoren * 2) Dichroidespiegel
Anämie Polyglobulie Leukozytose Leukopenie Thrombozytose Thrombopenie
Untersuchungsprofil: Kleines Blutbild Mann Frau Erythrozyten (RBC oder ERY) 4,8-5,9 Mio./µl 4,3-5,2 Mio./µl Leukozyten (WBC oder LEUK) 4.000-10.000 Mio./µl 4.000-10.000 Mio./µl Thrombozyten (PLT oder THRO) 150.000-400.000 Mio./µl 150.000-400.000 Mio./µl Hämoglobin (HGB oder HG) 14-18 g/dl 12-16 g/dl Hämatrokrit (HCT oder HKT) 40-52% 37-45%
Mittleres Zellvolumen Mittleres Zellhämoglobin Mittleres korpuskuläre Hämoglobinkonzentration
Diagnostik: Weißes Blutbild (Leukozytenbestand) Zellart Zellen pro µl Blut Anteil der Leukozyten Neutrophile Granulozyten segmentkernig Neurophile Granulozyten stabkernig Eosinophile Granulozyten Basophile Granulozyten 1700-7200 41-75 % 150-400 3-5 % 30-410 7% 10-70 1% Monozyten 200-800 4-13 % Lymphozyten 1000-2900 17-47 %
Untersuchungsprofil: Differentialblutbild Eosin Y Granulozytenfärbung: unterschiedliche Anfärbung mit Methylenblau und Eosin abhängig vom ph der Pufferlösung Methylenblau
Hämatopoetische Wachstumsfaktoren Wachstumsfaktor Produziert von Molekulargewicht Interleukin-3 T-Lymphocyten 20-26 kda GM-CSF T-Lymphozyten 14-35 kda Endothelzellen Fibroblasten M-CSF Monocyten 70 kda (Dimer) Fibroblasten Endothelzellen G-CSF Monocyten 20 kda Fibtoblasten Erythropoetin peritubuläre 34-39 kda Nierenzellen Thrombopoetin Leber-, 35 kda Nierenzellen
Differentialblutbild Lymphozyten Lymphozyten Granulozyten (eosinophil; basophil) Granulozyten (neutrophile) (polymorphkernige / z.b. Segmentkernige) Monozyten
Charakterisierung von Blutzellen - Detektion spezifischer Zellen im Blut Das CD-Klassifikationssystem Beruht auf monoklonalen Antikörpern CD = Cluster of Differentiation Zuordnungssystem mit mehreren hundert Zelloberflächenantigenen, die durch Monoklonalen Antikörper erkannt werden: CD1 bis > CD300 Mit diesen Antikörpern steht ein Werkzeug zur Verfügung, um Blutzellen näher zu identifizieren. Linienspezifische CD-Marker Differenzierungsstadien-spezifische CD-Marker
Charakterisierung von Blutzellen - Detektion spezifischer Zellen im Blut Das CD-Klassifikationssystem Linienspezifische CD-Marker (Beispiele): CD3: T-Lymphozyten CD19: B-Lymphozyten CD4: T-Helferzellen (Monozyten / Makrophagen) CD8: T8-Zellen (NK-Zellen) CD14: Monozyten Differenzierungsstadien-spezifische CD-Marker (Beispiele): CD34: Stammzellen (Vorläuferzellen) CD38: Aktivierungsmarker CD10: Marker von lymphoiden Vorläuferzellen (Akute Lymphoblastische Leukemie)