CytoBead Assays. CytoBead Automatisierung. Patente: EP , AU , CN , EP , TR ,
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- Hede Baumgartner
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1 Cyto Assays Cyto Automatisierung Patente: EP , AU , CN , EP , TR ,
2 Cyto Assays Technologie Klassischer Ablauf der Autoimmundiagnostik 2-Stufen Diagnostik 1. Screening 2. Bestätigung Zellbasierte IFA ELISA / Dot 1-Stufen Diagnostik IFA der nächsten Generation Cyto Technologie ANA / ANA 2 ANCA / RPGN CeliAK Automatische Auswertung mit dem AKLIDES System.
3 Technologie Cyto Assays Screening und Bestätigung in einem! Ein Well - ein Schritt - ein Assay Beispiel AKLIDES Cyto ANCA GBM negativ Referenz Granulozyten (EtOH) canca Muster PR3 positiv MPO negativ Referenz + + Antigen beschichteter (e.g. PR3) Primärantikörper (Patientenserum) Sekundärantikörper Fluorochrom markiert AKLIDES Cyto spart Zeit und Geld! Quantitative Bestimmung von Autoantikörpern mit AKLIDES.
4 Evaluierung Auswertung mit der Plattform Technologie AKLIDES Vollautomatisches Screening und objektive Auswertung der Zellen und Gewebe sowie automatische Mikropartikelidentifizierung und Messung der Ligandenfluoreszenzintensität der Mikropartikel Standardisierte und verläßliche Ergebnisse zwischen verschiedenen Instrumenten durch Intensitätskalibrierung ELISA typische Quantifizierung der Antikörper in U/ml or IU/ml mit Chargen spezifischen Standardkurven unter Mithilfe der 4 Punktkalibrierung Automatische Titervorhersage nur eine Probenverdünnung ist notwendig Gesamtreport von allen relevanten quantitativen Ergebnissen im pdf- und xls-format Single well report in pdf-format (including cell images) Gesamtreport
5 Cyto ANA / ANA 2 Schnelle und einfache ANA Diagnostik ANA (Anti-Nucleäre Antikörper) sind Autoantikörper, die Antigene im Zellkern erkennen. Bei der indirekten Immunfluoreszenz in menschlichen Tumorzellmonolayern, wie HEp-2-Zellen, zeigen diese Antikörper eine charakteristische Färbung von Kernstrukturen. Die Klassifizierung der ANA erfolgt in Übereinstimmung mit den Zielantigenen. Cyto ANA 4 Einzigartige Kombination von HEp-2 Zellen mit Antigen beschichteten Mikropartikeln Vorteile des Cyto ANA / ANA 2 Screening mit standardisierten HEp-2 Zellen Bestätigung von 8 ANA Spezifitäten mit Mikropartikeln 3 HEp-2 Zellen 1 2 Cyto ANA / ANA 2 HEp-2 Zellmuster Example: Kom- Anti-Ro52 parti-positive (positiv) ment Quantifizierung Antigen Klinische Relevanz Homogen 3 IU/ml dsdna Systemischer Lupus Erythematosus (SLE) U/ml Scl-70 Progressive systemische Sklerose (PSS) 2 U/ml Sm Sm Antikörper hochspezifisch für SLE; hohe anti-nrnp Titer spezifisch für Mischkollagenosen (MCTD) zusammen mit anderen U/ml nrnp ANAs in rheumatoider Arthritis (RA), SLE, PSS Gesprenkelt 4 U/ml U/ml Ro60/SS-A Ro52/SS-A Häufig im primären Sjögren s Syndrom, anti-ss-a häufig im neonatalen Lupus 1 U/ml La/SS-B Zentromer 1 U/ml CENP-B CREST Syndrom, selten in diffuser Sclerodermie und Raynaud s Syndrom Cyto ANA 2, der Jo-1 Mikropartikel ersetzt den CENP-B Mikropartikel Zytoplasmatisch 1 U/ml Jo-1 Polymyositis, Dermatomyositis Kleiner : negativ Großer : negativ Referenzbead in jedem Kompartiment
6 Cyto ANCA / RPGN Schnelle und einfache ANCA Diagnostik Cyto ANCA Granulozyten (EtOH) 1 2 ANCAs (Anti-Neutrophile Zytoplasmatische Antikörper) spielen eine wichtige Rolle bei der Diagnose von systemischer Vaskulitis. Gemäß den internationalen Richtlinien werden sie durch indirekte Immunfluoreszenz Tests mit ethanolfixierten Granulozyten bestimmt. Es wird zwischen zytoplasmatischen (canca; antigen PR3) and perinucleären (panca; antigen MPO) IIF Mustern unterschieden. Einzigartige Kombination von ethanolfixierten Granulozyten mit antigenbeschichteten Mikropartikeln Cyto RPGN Granulozyten (EtOH) Vorteile des Cyto ANCA Screening mit standardisierten ethanolfixierten Granulozyten Bestätigung von 3 Antikörperspezifitäten mit Mikropartikeln RPGN (Rasch progrediente Glomerulonephritis) 1 2 Speziell in Notsituationen Vorteile des Cyto RPGN Screening mit standardisierten ethanolfixierten Granulozyten Bestätigung von 4 Antikörperspezifitäten mit Mikropartikeln Cyto ANCA / RPGN (positiv) Granulozytenmuster Kompartiment Quantifizierung Antigen Klinische Relevanz negativ 1 U/ml GBM Goodpasture Syndrom zytoplasmatisch 2 IU/ml PR3 Granulomatose mit Polyangiitis perinucleär 2 IU/ml MPO Mikroskopische Polyangiitis, eosinophile Granulomatose mit Polyangiitis, Polyateriitis Nodosa Zusätzlich im Cyto RPGN nucleär 1 IU/ml dsdna Lupus Nephritis Kleiner : negativ Großer : negativ Referenzbead in jedem Kompartiment
7 Cyto CeliAK Schnelle und einfache Diagnostik von Zöliakie oder Dermatitis Herpetiformis sowie Ausschluß von IgA Mangel Zöliakie (Gluten induzierte Enteropathie) ist eine Unverträglichkeit gegenüber Gluten. Diese Unverträglichkeit führt zu weiteren Läsionen der Mukosa, die sich als "flache" Schleimhäute manifestieren. Gliadin, die alkohollösliche Fraktion des Glutens, ist für die Entstehung von Zöliakie verantwortlich. Gliadin induziert inflammatorische Prozesse in der Dünndarmmucosa unter Beteiligung humoraler und zellulärer Immunprozesse. Die Diagnose der Zöliakie ist charakterisiert durch hochspezifische Autoantikörper gegen Transglutaminase 2 (Gewebe-Transglutaminase, ttg) und deamidiertes Gliadin (DG). Endomysium-Antikörper (EMA) sind direkt gegen extrazelluläre ttg gerichtet. Bis auf AAk gegen DG sind EmA typischerweise IgA-Antikörper. Bei Zöliakie-Patienten mit IgA-Mangel bilden Antikörper des IgG-Typs die Grundlage für die Diagnose. Cyto CeliAK Affenösophagus 1 2 Einzigartige Kombination von Affenösophagus mit antigenbeschichteten Mikropartikeln Vorteile des Cyto CeliAK Screening mit standardisiertem Affenösophagus Gewebe Bestätigung von 3 Antikörperspezifitäten mit Mikropartikeln Cyto CeliAK (positiv) Affenösophagusmuster Kompartiment Quantifizierung Antigen Klinische Relevanz wabenförmige Fluoreszenz der Muscularis mucosae 1 U/ml ttg 1 U/ml DG Zöliakie, Dermatitis Herpetiformis 2 U/ml IgA IgA Mangel Kleiner : negativ Großer : negativ Referenzbead in jedem Kompartiment
8 Cyto Assays Bestellinformation AKLIDES Cyto ANA Bestell-Nr AKLIDES Cyto ANA 2 Bestell-Nr AKLIDES Cyto ANCA Bestell-Nr AKLIDES Cyto RPGN Bestell-Nr AKLIDES Cyto CeliAK Bestell-Nr Literatur Simultaneous detection of celiac disease-specific IgA antibodies and total IgA. Grossmann K, Röber N, Hiemann R, Rödiger S, Schierack P, Reinhold D, Laass M.-W., Conrad K, Roggenbuck, D. Auto Immun Highlights Dec, 7(1): 2. Second generation analysis of antinuclear antibody (ANA) by combination of screening and confirmatory testing. Scholz J, Grossmann K, Knütter I, Hiemann R, Sowa M, Röber N, Rödiger S, Schierack P, Reinhold D, Bogdanos DP, Meroni PL, Radice A, Conrad K, Roggenbuck D. Clin Chem Lab Med 2015, 53(12): Simultaneous automated screening and confirmatory testing for vasculitis-specific ANCA. Sowa M, Grossmann K, Knütter I, Hiemann R, Röber N, Anderer U, Csernok E, Bogdanos DP, Borghi MO, Meroni PL, Schierack P, Reinhold D, Conrad K, Roggenbuck D. PLoS One. 2014, 9(9):e The Cyto assay - a novel approach of multiparametric autoantibody analysis in the diagnostics of systemic autoimmune diseases. Sowa M, Grossmann K, Scholz J, Röber N, Rödiger S, Schierack P, Conrad K, Roggenbuck D, Hiemann R. J Med Lab 2014; 38: MEDIPAN GMBH Ludwig-Erhard-Ring Dahlewitz/Berlin Deutschland Telefon: +49 (0) Fax: +49 (0) info@medipan.de MP-BR-D-AKLIDES-Cyto_v
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