Klinische Chemie und Laboratoriumsdiagnostik Vorlesung: Tumormarker
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- Klaudia Pfeiffer
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1 Klinische Chemie und Laboratoriumsdiagnostik Vorlesung: Tumormarker Dr. rer. nat. Manfred Fobker Centrum für Laboratoriumsmedizin Zentrallaboratorium Universitätsklinikum Münster Albert-Schweitzer-Campus 1 D Münster Tel.: Fax: fobker@uni-muenster.de Sommersemester
2 Häufigkeit von Tumorerkrankungen Todesfälle in Deutschland pro Jahr! -2-
3 Prozentualer Anteil der Zahl der Krebssterbefälle in Deutschland -3-
4 Inzidenzraten für maligne Melanome -4-
5 Krebsrisiko steigt exponentiell mit dem Lebensalter -5-
6 Gesetzliches Krebsfrüherkennungsprogramm Teilnahme freiwillig -6-
7 Gesetzliches Früherkennungsprogramm -7-
8 Gesetzliches Früherkennungsprogramm Es ist leicht verständlich, daß bis heute viel Aufmerksamkeit darauf verwandt wurde, die Serologie von Tumoren zu untersuchen, um eine diagnostische Methode für die Messung der Malignität zu entwickeln. K. Landsteiner,
9 -9-
10 Definition Alle nachweisbaren Substanzen, die auf einen Tumor hinweisen oder zur Charakterisierung und Messung seiner Ausbreitung und Therapie-Ansprechen beitragen können von malignen Tumorzellen direkt gebildet Synthese wird in normalen Zellen durch den Tumor induziert (CRP, Anti-p53, Ferritin) besitzen folgende Struktur: Onkofetale Antigene (z.b. Carcinoembryonales Antigen) Mit monoklonalen Antikörpern reagierende Epitope (z.b.ca 19.9, CA 15.3) Hormone (z.b. HCG, Prolactin, ACTH, Calcitonin, VIP, Insulin, Adrenalin) Enzyme (z.b Neuronenspezif. Enolase, Thymidinkinase, Alkal.-Phosphatase-Isoenz.) Serumproteine (Thyreoglobulin, ß2-Mikroglobulin) Immunglobuline (Bence-Jones-Proteine, monoklonale Ig) -10-
11 Einteilung Humorale (Zirkulierende) Marker: Serum, Plasma (Material beachten) z.b. Immunologische Verfahren Zelluläre Marker: Tumorgewebe z.b. Histozytochemie, Durchflusszytometrie, Zytogenetik, PCR -11-
12 Alpha-Fetoprotein (AFP) = Leber, Hoden, Ovar Calcitonin = C-Zellkarzinom Cancer-Antigen 125 (CA 125) = Ovar Cancer-Antigen 15.3 (CA 15.3) = Mamma Cancer-Antigen 19.9 (CA 19.9) = Pankreas,Galle Cancer-Antigen 72.4 (CA 72.4) = Magen,Ovar Carcinoembryonal. Antigen (CEA) = Kolon, Mamma Cytokeratin-Fragment (Cyfra 21.1) = Nichtkleinzelliges Bronchialkarzinom Humanes Choriongonadotropin (HCG) = Keimzelltumore Neuronen-spezifische Enolase (NSE) = Neuroblastom, Kleinzelliges Bronchialkarzinom Pro Gastrin Releasing Peptide (ProGRP) = kleinzelliges Bronchialkarzinom Prostata spezifisches Antigen (PSA) = Prostata Squamous cell carcinoma Antigen (SCC) = Plattenepithelkarzinom (Zervix, HNO, Ösophagus) S100 = Melanom, Neurodestruktion Thyreoglobulin = differenz. Schilddrüsenkarzinom -12-
13 -13-
14 UKM Universitätsklinikum Münster -14-
15 Tumormarkerkombinationen In der Regel nur 1 Tumormarker für Kontrolle eines Tumors Ausnahme: AFP+ß-HCG: Keimzelltumoren CA CEA: Mammakarzinom CA CEA: Magenkarzinom -15-
16 Wie werden humorale Tumormarker bestimmt? -16-
17 -17-
18 Methodenwechsell PSA ng/ml Monate -18-
19 Methodenwechsell Bei Verlaufskontrollen der gleiche Test vom gleichen Hersteller! Laborbefund: Hersteller/Datum bei Umstellung/Referenzbereich (testspezifisch) -19-
20 Assay Unterschiede Antikörper Kalibrierung Assay-Dynamik: Equilibrium? Equimolarität -20-
21 Cardimac -21-
22 -22-
23 t-psa [ng/ml] 0,50 0,40 0,30 0,20 0,10 0,00 Varianz ohne PSA Anstieg Monate Individuelle Varianz ca. 20% + analytischer Varianz ca. 10% Signifikanter Markeranstieg/-abfall erst bei 30-50% -23-
24 Aasee Area: 40 Hektar Depth: 2 m = 8 x 10 8 Liter PSA Assay lower limit of detection 0,01 ng/ml = 10-8 g/l Cube sugar 2 g: -24-
25 -25-
26 Eigenschaften und Einsatzgebiete von Tumormarkern -26-
27 Hohe Sensitivität! Korrelation mit der Entstehung, dem Wachstum und der Therapie-bedingten Verkleinerung eines Tumors Diagnostische Sensitivität: (richtig Testpositive /Kranken Frühstadium: 10-30% Manifest: % Disseminierte: 70-90% -27-
28 -28-
29 In-vivo Einflussgrößen: Tumormasse,-invasion,-vaskularisierung -29-
30 Verlauf chron. Pankreatitis mit Cholestase -30-
31 Der ideale Tumormarker Hohe Sensitivität Hohe Spezifität Unterstützung bei der Therapieentscheidung Gute Organspezifität Korrelation mit Tumormasse und -stadium Prognostische Aussage -31-
32 Screening mit Tumormarker Kein Tumormarker ist geeignet ( zu geringe Sensitivität und Spezifität, zu geringe Prävalenz) Screening von Risikogruppen: AFP (Leberzirrhose) PSA (Männer > 50Jahre) Calcitonin/RET-Onkogen: familiäres Schilddrüsenkarzinom -32-
33 Carcinoembryonales Antigen (CEA) -33-
34 Screening von Kolonkarzinomen mit CEA -34-
35 Colitis ulcerosa- Übergang zum Kolonkarzinom -35-
36 Meist unbrauchbar Tumorlokalisation Ausnahme: PSA Thyreoglobulin Pro GRP -36-
37 Wann? Vor Therapiebeginn (erhebliche Unterschiede im individuellen Ausgangswert) Nach Therapieende -Nach 3-24d (3 HWZ) -3-monatlich (1+2 Jahr) -Halbjährlich (3-5 Jahr) Vor Therapiewechsel Bei Rezidivverdacht Bei Wiederanstieg nach 2-4 Wochen -37-
38 Halbwertzeiten Nach Tumorentfernung innerhalb von 4-8 Wochen auf Normalwert -38-
39 Differentialdiagnostik von Keimzelltumoren -39-
40 ß 2 -Mikroglobulin -40-
41 Prognosemarker -41-
42 -42-
43 -43-
44 Treffsicherheit PSA / Tastbefund / TRUS nur PSA > 4 6 nur DRU auffällig 13 nur TRUS auffällig 16 PSA & DRU auffällig PSA & DRU & TRUS auffällig ERSPC Rotterdam: 967 Biopsien (Biopsie/PCa) Bangma Urologe A39: 334,
45 Beginn Erkennbarkeit Früherkennung Symptome Diagnose Metastasen Tod Überleben? natürlicher Verlauf Prostatakarzinom frühe Therapie späte Therapie Überleben nach Früherkennung PSA -45-
46 -46-
47 -47-
48 -48-
49 PSA-basierte Früherkennung senkt Mortalität um 20%. Nur ca. 23% der Patienten sterben an den Folgen des Prostatakarzinoms -49-
50 Therapie-Steuerung am Beispiel des Mamakarzinoms -50-
51 -51-
52 Östogen- und Progesteronrezeptor-Status -52-
53 Trastuzumab (Handelsname: Herceptin Monoklonaler Antikörper gegen den Wachstumsrezeptor Her2 (Humaner Epidermaler Wachstumsfaktor Rezeptor) Überexpression von Her2 bei etwa jeder vierten Brustkrebspatientin Durch Bindung kommt es zur Hemmung der Tumorzellproliferation -53-
54 Genetische Analytik -54-
55 Tumorsupressor p53-55-
56 -56-
57 Defekte DNA-Reparatursysteme -57-
58 -58-
59 Krebsgene -59-
60 Chromosomale Translokation (Burkitt-Lymphom) -60-
61 Proteomics Seren von 50 Frauen mit und 50 Frauen ohne Ovarialkarzinom analysiert mittels Matrix-assistierte Laser-Desorptions-Flugzeitmassenspektrometrie (MALDI-TOF) For the discrimination of ovarian cancer, the pattern is formed by the combination of spectral amplitudes at five precise M/Z values. Sensitivität: 100% Spezifität: 94% Prävalenz für Ovarialkarzinom 1/5.000 Nur 1 Frau von 250 mit einem positiven Ergebnis leidet tatsächlich an Ovarialkarzinom Petricoin et al. Lancet 2002, 359:
62 Zusammenfassung Hauptindikation ist Therapieerfolgs- & Verlaufskontrolle Zeigt frühzeitig ein Rezidiv an (hohe Sensitivität, schlechte Spezifität) Kein Screening im Normalkollektiv Kontrolle von Risikogruppen (u.a.leberzirrhose, Schilddrüsenkarzinom) Prognostische Aussagen Differentialdiagnose (Keimzelltumore) Keine Tumorlokalisation (Ausnahmefälle) Entnahmezeit beachten (individuelle Werte, Primärdiagnose, Halbwertz.) Methodenabhängigkeit große Hoffnung in neue Methoden (Molekulardiagnostik, Proteomics) -62-
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