Zweigbibliofhek Medizin

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1 Sächsische Landesbibliothek - Staats- und Universitätsbibliothek Dresden (SLUB) Zweigbibliothek Medizin Diese Hochschulschrift finden Sie original in Printform zur Ausleihe in der Zweigbibliofhek Medizin Nähere Angaben zu Standort, Öffnungszeiten usw. finden Sie auf der Homepage der SLUB. Auf den folgenden Seiten finden Sie Titelblatt und Inhaltsverzeichnis der Hochschulschrift.

2 Abteilung Neuropädiatrie (Leiterin: Prof. Dr. Hrissanthi Ikonomidou) Klinik für Kinder- und Jugendmedizin Universitäts-Klinikum Carl Gustav Carus Dresden (Direktor: Prof. Dr. Manfred Gahr) Die Muskeldystrophien Methoden zur Analyse der Genotyp-Phänotyp-Beziehung Habilitationsschrift zur Erlangung des akademischen Grades Doctor medicinae habilitatus (Dr. med. habil.) der Medizinischen Fakultät Carl Gustav Carus der Technischen Universität Dresden vorgelegt von Dr. Maja von der Hagen aus Dresden Dresden 2007

3 Die Muskeldystrophien Methoden zur Analyse der Genotyp-Phänotyp-Beziehung Vorwort Inhaltsverzeichnis Abkürzungen II V IX 1. Mikrosatellitenanalysen zur Differentialdiagnostik neuromuskulärer Erkrankungen Einleitung Neuromuskuläre Erkrankungen Klassifikation und Klinik Die Muskeldystrophien Die kongenitalen Myopathien Die kongenitalen myasthenen Syndrome Die lonenkanalerkrankungen Proteine der Muskelzelle und extrazellulären Matrix Diagnostik neuromuskulärer Erkrankungen Ziele und Fragestellung Ergebnisse Ergebnisse der Kopplungsanalysen bei 160 Familien mit unklassifizierter NME Identifizierung des molekularen Defektes nach Kopplungsanalyse in einer Familie mit kongenitaler Myopathie (CM) Identifizierung des molekularen Defektes nach Kopplungsanalyse in einer Familie mit kongenitaler Muskeldystrophie (MDC) Identifizierung des molekularen Defektes nach Kopplungsanalyse in einer Familie mit autosomalrezessiver Muskeldystrophie vom Gliedergürteltyp (LGMD2) Diskussion Ausblick 32 V

4 2. Die Muskeldystrophie vom Gliedergürteltyp (LGMD) 21: Eine Genotyp-Phänotyp-Analyse Einleitung Klinische Symptome und Epidemiologie Hypothesen zur Pathogenese der LGMD2I Ziele und Fragestellung Ergebnisse Phänotyp der LGMD2I Kardiorespiratorische Komplikationen bei LGMD2I: Genotyp-Phänotyp-Analyse (homozygote versus compound heterozygote FKRP c.826c>a-mutation) Diskussion Genotyp-Phänotyp-Korrelation bei LGMD2I Offene Fragen Microarray-basierte Expressionsanalyse des dysferlin-defizienten Mausmodells Einleitung Mutationen im Dysferlin-Gen führen zur proximalen Muskeldystrophie LGMD2B, distalen Miyoshi-Myopathie und anteriotibialen Muskeldystrophie Hypothesen zur Pathogenese der dysferlin-defizienten Muskeldystrophie Microarray-basierte Expressionsanalyse der Skeletmuskulatur Tiermodell: Die C57BI/10.SJL-Dysf-Mausmutante Ziele und Fragestellung Ergebnisse Histomorphologie des Skeletmuskeis der C57BI/10.SJL-Dysf- und der C57BI/10-Mäuse Analyse der differentiellen Genexpression im proximalen und distalen Muskel der C57BI/10-Wildtypmaus und der C57BI/10.SJL-Dysf-Maus Verifizierung der RNA-Expressionsdaten mit Echtzeit-PCR Immunfluoreszenz-Analyse der S100A9 Protein-Verteilung Diskussion Differentielle Genexpression im proximalen und distalen Muskel der C57BI/10-Maus 75 VI

5 Einfluss der Variable Dysferlin-Defizienz auf die Genexpression im proximalen und distalen Muskel der C57BI1O.SJL-Dys/-Mausmutante Vergleich des Transkriptoms der dysferlin-defizienten Muskelzellen mit dem Expressionprofil verschiedener monogener Muskeldystrophien Interpretation der Microarray-Daten Methoden Mikrosatellitenanalysen zur Differentialdiagnostik neuromuskulärer Erkrankungen Rekrutierung und Phänotypisierung von Patienten mit NME unklarer Klassifizierung Kopplungsanalysen mit Mikrosatelliten-Markern Muskeldystrophie vom Gliedergürteltyp (LGMD) 21: Eine Genotyp-Phänotyp-Analyse Phänotyp LGMD2I Kardiorespiratorische Komplikationen bei L.GMD2I, eine Multicenterstudie Microarray-basierte Expressionsanalyse Microarrays Hybridisierung und Scannen der Oliognukleotid- Microarrays Datenanalyse der U74A-C-Microarrays Realtime-PCR Histologie und Immunhistochemie Allgemeine Labormethoden DNA-Isolierung RNA-Isolierung Herstellung von cdna durch reverse Transkription Westemblot PCR Zusammenfassung Mikrosatellitenanalvsen in der Differentialdiaanostik neuromuskulärer Erkrankungen Muskeldystrophie vom Gliedergürteltyp (LGMD) 21: Eine Genotyp-Phänotyp-Analyse 108 VII

6 5.3. Mikroarray-basierte Expressionanalyse im Skeletmuskel der C57Bl/10-Maus und im C57BI/10.SJL-Dysf -Mausmodell Literatur und Datenbanken Literatur Datenbanken 131 Danksagung 132 VIII