Weiterbildungsprogramm Fachkraft für Molekularbiologie und Fachkraft für Molekularbiologie und klinische Forschung

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1 Weiterbildungsprogramm Fachkraft für Molekularbiologie und Fachkraft für Molekularbiologie und klinische Forschung Berufsbegleitender Grundlagenkurs (Blockkurs) Termine Blockkurs : 1.Termin: bis und Termin bis und bis MolBio Montag Mittwoch (inkl. Sa.) 9Tage 9 bis 17 Uhr 81 Std. LE á 60min (108 LE á 45 min) Grundlagen, Labormethoden und Anwendungen der Molekularen Biologie Kl. Forsch. 3Tage Verlängerung Donnerstag - Samstag insgesamt: 12 Tage 9 bis 18 Uhr 108 Std. LE á 60min (144 LE á 45min) Anwendungen der Molekularen Medizin Ort: Gläsernes Labor, Campus Berlin-Buch Anmeldung und Informationen: Daniela Giese Robert-Rössle-Str. 10, Berlin-Buch d.giese@bbb-berlin.de Telefon / Fax: / 2927 Prüfung: Abschlussprüfung kann zum gleichen Termin für beide Fachkraftkurse abgelegt werden! Preis: MolBio 1.150,- MolBio und kl. Forschung 1.350,- 1

2 Programm: Modul Tag Curriculum Zentrale Dogma der Molekularbiologie: - Struktur der DNA (Gene, Chromosomen, Genome, Mikrosateliten-DNA) - Struktur der RNA (m, t, r-rna) - Replikation Grundlagen 1 - Transkription, Prozessieren und Spleißen Mutation und Rekombination - Proteine: (Aminosäuren, Primär-, Sekundär-, Tertiär- und Quartärstruktur, Bsp. für humane Proteine) - Translation - genetischer Code - Genexpression und Translationsregulation - Genidentifikation und -analyse Isolierung, Reinigung, Trennung und Visualisierung von Nukleinsäuren: - Ethanolfällung / Phenol-Chloroform-Extraktion - Silica-Säulen-Systeme Molekularbiologische - Magnet-Partikel-Extraktion (Automatisierte Systeme) - RNA-Isolation 2 - Qualitätsanalyse und Quantifizierung von DNA Elektrophoretische Trennmethoden: - Prinzip und Praxis der Nukleinsäuretrennung, Agarose und PAA Gele - Kapillarelektrophorese - Besonderheiten der RNA-Trennung Molekularbiologische 3 Rekombinante DNA Klonieren: - Restriktionsenzyme - Internetanwendung (NEB cutter) - Restriktionsverdau - Alkalische Phosphatase, Ligase Rekombinante DNA Klonieren: - Vektoren, Plasmide - Plasmidkarten lesen und im Internet finden - Selektionsmarker (ATB Resistenz, blue white screening) - Transformationstechniken (Transformation, Transduktion) 2

3 Molekularbiologische Molekularbiologische Proteinanalytische Statistik für Laboranwendungen: - Grundlagen in Excel - absolute und relative Verweise in Zellen - Auswertung einer kolorimetrischen Messung in Excel - Erstellung einer linearen Gleichung für einen Standard - Anwenden von Funktionsverweisen und Argumenten in Excel - Besprechung von Aufgaben und Lösungen in Excel für den Laborbetrieb DNA- und Proteinchips - Typen von DNA- und Proteinarrays - Herstellung von DNA-Microarrays und Proteinarrays - technische Plattformen - Einsatzmöglichkeiten von DNA-Chips in der Diagnostik und Forschung - Einsatzmöglichkeiten von Proteinarrays in der Diagnostik und Forschung - Differentielle Genexpressionsanalyse PCR in Diagnostik und Forschung - Prinzip der PCR und RT-PCR - Real-Time-Quantitative PCR (+1 diagnostische Anwendungsbsp.) - Multiplex-PCR zur DNA-Typisierung (Genetischer Fingerabdruck) - TaqMan-PCR - NAT-Techniken in der med. Diagnostik (Zielsequenzamplifikationstechniken: 3SR [self-sustained sequence replication], NASBA [nucleic acid sequence based amplification], strand displacement amplification, Ligase- Ketten-Reaktion [Firma Abbot]) - Automatisierte Systeme - Internetanwendung: PCR-Primer Design (Primer3) Sequenzierung - Das Kettenabbruchverfahren - Next generation sequencing - Entschlüsselung der DNA-Sequenz - Human-Genom-Projekt - Erstellung von Karten der Proteinanalyse I - Aufreinigung von Proteinen - Zellaufschluss - Fällung - Chromatographische - Elektrophorese / SDS-PAGE 3

4 Proteinanalytische (Immunochemische) 7 der Proteinanalyse II - Quantitative und qualitative Proteinbestimmungen - Quantitative Proteinbestimmungen (chemische, spektroskopische, spezielle physikalische und biochemische ) - Spezielle Analytik (Enzyme, Rezeptoren) - Qualitative Proteinbestimmungen (Sequenzanalyse, Strukturanalyse) Immunologische und immunchemische I - Grundlagen der Immunologie: Struktur von Antikörpern, Bildung von AK im Organismus, Herstellung monoklonaler AK - Grundlagen immunologischer (AG-AK-Reaktion) Immunologische und immunchemische II - Western-Blot - ELISA Zellbiolog. Techniken 8 Laborausstattung für molekularbiologische und Zellkultur Arbeiten - Bio- und Gefahrstoffverordnung - Gentechnische Sicherheit (S1 bis S4) Zellbiologische Techniken I - Aufbau der Zellen (Pro- / Eukaryonten) - von der Zelle zum Gewebe Differenzierung Zell-, Gewebe-, Organkultur, permanente Zelllinien und Primärzellen Voraussetzungen für eine erfolgreiche Zellkultur - Grundlagen der Steriltechnik; Grundsätze zum sterilen Arbeiten - Sterilisationsverfahren (Desinfektion, Hitzeinaktivierung) - Geräte insbesondere Sicherheitswerkbank und CO 2 -Inkubator - Materialien Glas und Einwegmaterial - Nährmedien und Zusätze Zellbiologische Techniken II - Zellkulturmedien: Herstellung, Zusätze und CO 2 -Puffersystem - Proliferation, Vitalität und Apoptose in der Zellkultur: Definitionen und Nachweise der Proliferation und Vitalität - Apoptose und Nekrose: Bedeutung und morphologische Charakteristika; Signalkaskade, Nachweismethoden - FASC 4

5 Internetrecherche Molekulare Medizin 9 10 Molekulare Medizin 11 Bioinformatik I - Arbeiten mit dem Internet - Informationsquellen zur Molekularbiologie im Internet - Datenbanken eine Einführung - Sequenzformate (GenBank, FASTA) und Zugriffsnummern - Speicherung und Bearbeitung von Nukleotid- und Aminosäure-Sequenzen Programme der Sequence Manipulation Suite - Bioinformatik II - DNA-Restriktionsanalyse in silico o REBASE o Restrictioncutter - Sequenz-Ausrichtungen (Multiple Alignments) erstellen mit Hilfe von Clustal W o Daten Exportieren und Importieren am Beispiel von ClustalW zu GeneDoc o Phylogenetische Bäume erstellen am Beispiel von TreeView - Praktische Übungen im Internet (Restriktionskarten, Primerdesign, Multiple Alignments, Informationssuche im Internet) Molekulare Ursachen von Krankheiten I - Polymorphismus und Mutationen (Genom-, Chromosom- und Genmutationen anhand von Krankheitsbildern) - DNA-Reparatur und Reparaturdefekte - Genetik monogener Erkrankungen - Autosomal-dominante Vererbung (Familäre Hypercholesterinämie, Cardiomyopathien, BRCA-1-Gen) - Autosomal-rezessive Erkrankungen (Cystische Pankreas Fibrose, Phenyketonurie) X-chromosomale Erkrankungen (Muskeldystrophie, Hämophilie A+B Molekulare Ursachen von Erkrankungen II - Ursachen und Diagnostik polygener komplexer Erkrankungen - Zivilisationserkrankungenan ausgewählten Beispielen (Arteriosklerose, Hypertonie, Diabetes mellitus, Alzheimer, Parkinson) - Molekulare Ursachen von Tumorerkrankungen - Tumorgene (Onkogene, Tumorsuppressorgene, Reparaturgene) - Tumorprogressionsfaktoren (chem. Cancerogene, Strahlung, Viren) - Epigenetische Mechanismen bei der Tumorentwicklung - Familiäre Tumorerkrankungen (Colon-Ca, Brustkrebs) - Therapie von Tumorerkrankungen Immunologische Tumorabwehr 5

6 Molekulare Medizin 12 Individualisierte Medizin / Pharmakogenetik - Grundbegriffe der Pharmakogenetik und Erläuterung der wichtigsten Begriffe - zur high-troughput DNA-Extraktion und zur Genotypisierung - Studiendesign pharmakogenetischer Untersuchungen - Klinische Beispiele der Auswirkungen genetischer Polymorphismen - Pharmakogenetik in der pharmazeutischen Industrie - Pharmakogenetik und Bioethik - Pharmakogenetik in der Arzneimittelzulassung - Genetische Unterschiede in der Pharmakokinetik Molekulare Therapien I - Synthese rekombinanter Proteine, rekombinante Proteine als Medikamente - DNA als Impfstoff - sirna zum Ausschalten krankheitsrelevanter Gene - Immuntherapie mit CpG-Oligonukleotiden - Gentechnisch hergestellte Arzneimittel Molekulare Therapien II - Stammzellforschung - Therapeutisches und reproduktives Klonen - Somatische Gentherapie - Antisense-Oligonukleotide und Ribozyme - Xenotransplantationen Tissue Engineering 6