Kursinhalte der Weiterbildung Molekulare Biotechnologie (MNr.: 237 / 0411 / 2010)

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1 Kursinhalte der Weiterbildung Molekulare Biotechnologie (MNr.: 237 / 0411 / 2010) Schwerpunkte im Bereich BIOANALYTIK Polyacrylamidelektrophorese von Nukleinsäuren im Vertikalsystem Agarosegelelektrophorese von Nukleinsäuren im Horizontalsystem Protein- und Enzymanalytik Proteinbestimmungsmethoden (Extinktion bei 280nm, BCA, Bradford) Optisch-enzymatischer Test (Hyperchromer Effekt) Bestimmung der Enzymaktivität für Ribonuklease A und T1 Bestimmung der Enzymaktivität von Alkoholdehydrogenase aus Hefe Immunologische Nachweisverfahren Dot-Blot-Verfahren Western-Blot im SemiDry-Verfahren Western-Blot im Tankverfahren ELISA Chromatographische Verfahren High Performance Liquid Chromatography (HPLC) Umkehrphasen Chromatographie Ionenaustauschchromatographie Molekularsiebchromatographie Affinitätschromatographie "Biochemie und Bioanalytik", "Allgemeine und organische Chemie", "Mathematik für das Labor / Physikalische Chemie" und "Zellbiologie" erteilt. Schwerpunkte im Bereich GENTECHNIK Mikrobiologische Grundlagen Steriles Arbeiten, Sicherheit im Labor Bakterielles Wachstum und Kultivierung Wachstum und Kultivierung von Hefezellen Herstellung kompetenter Bakterienkulturen Herstellung von Hefe-Sphäroblasten Übertragung von Vektoren in Bakterienzellen durch Transformation 21. März

2 DNA-Isolierung und -Untersuchung Isolierung genomischer DNA aus Hefe und Bakterien Elektrophoretische Analyse von DNA Isolierung von DNA aus Agarosegelen Enzymatische Modifikation von DNA Sequenzierung von DNA RNA-Isolierung und -Untersuchung Isolierung von Gesamt-RNA aus Hefe Elektrophoretische Analyse von RNA Isolierung von mrna durch Affinitätschromatographie an Oligo dt. Reverse Transkription von mrna und Herstellung einer cdna Bank Polymerasekettenreaktion (PCR) PCR als Screening- bzw. Anreicherungsmethode für bestimmte Sequenzen Reverse Transkriptase PCR Amplifikation eines vollsynthetischen Gens Nested-PCR Isolierung von DNA aus PCR-Ansätzen Klonierungsstrategien Nutzung von DNA-Sequenz-Datenbanken im Internet Nutzung von Codon-Usage-Tabellen Konzeptionierung und Totalsynthese eines funktionalen Gens 'in vitro' Klonierung von DNA in ein System, das Blue/White-Screening erlaubt Direkte PCR-Klonierung Überprüfung von Klonierungserfolgen Analytische Restriktionshydrolysen Southern-Blot-Analyse Induktion der Expression klonierter Gene Isolierung exprimierter Proteine aus Zelllysaten Funktioneller und immunologischer Nachweis exprimierter Proteine "Nukleinsäureanalytik und Gentechnik", "Angewandte Biotechnologie" sowie "Zell- und Molekularbiologie" erteilt. 21. März

3 Kursinhalte des Modulkurses BIOANALYTIK Protein- und Enzymanalytik Quantitative Proteinanalyse (Extinktion bei 280nm, BCA, Bradford, Lowry) Optisch-enzymatische Testverfahren (Hyperchromer Effekt, Bestimmung der Enzymaktivität für Ribonuklease A und T1, Bestimmung der Enzymaktivität von Alkoholdehydrogenase aus Hefe, Bestimmung der Enzymaktivität von Lysozym) Polyacrylamidelektrophorese von Nukleinsäuren im Vertikalsystem Agarosegelelektrophorese von Nukleinsäuren im Horizontalsystem Nukleinsäureanalytik Southern-Blot Verfahren Immunologische Nachweisverfahren Dot-Blot-Verfahren Western-Blot im SemiDry-Verfahren Western-Blot im Tankverfahren ELISA Chromatographische Verfahren High Performance Liquid Chromatography (HPLC, Umkehrphasen Chromatographie, Ionenaustauschchromatographie, Gelpermeationschromatographie, Affinitätschromatographie) "Biochemie", "Bioanalytik", "Allgemeine und Organische Chemie", "Mathematik für das Labor", "Biophysikalische Chemie", "Zellbiologie" und "Fachenglisch" erteilt. 21. März

4 Kursinhalte des Modulkurses GENOMIK Mikrobiologische Grundlagen Steriles Arbeiten, Sicherheit im Labor Bakterielles Wachstum und Kultivierung Wachstum und Kultivierung von Hefezellen Herstellung von Hefe-Sphäroblasten Übertragung von Vektoren in Bakterienzellen durch Transformation DNA-Isolierung und - Untersuchung Isolierung genomischer DNA aus Hefe und Bakterien Elektrophoretische Analyse von DNA Isolierung von DNA aus Agarosegelen Enzymatische Modifikation von DNA Sequenzierung von DNA RNA-Isolierung und -Untersuchung Isolierung von Gesamt-RNA aus Hefe Elektrophoretische Analyse von RNA Isolierung von mrna durch Affinitätschromatographie an Oligo dt. Reverse Transkription von mrna und Herstellung einer cdna Bank Polymerasekettenreaktion (PCR) PCR als Screening- bzw. Anreicherungsmethode für bestimmte Sequenzen Reverse Transkriptase PCR Amplifikation eines vollsynthetischen Gens Nested-PCR Isolierung von DNA aus PCR-Ansätzen Klonierungsstrategien Nutzung von DNA-Sequenz-Datenbanken im Internet Konzeptionierung und Totalsynthese eines funktionalen Gens 'in vitro' Klonierung von DNA in ein System, das Blue/White-Screening erlaubt Direkte PCR-Klonierung Überprüfung von Klonierungserfolgen Induktion der Expression klonierter Gene Isolierung exprimierter Proteine aus Zelllysaten Funktioneller und immunologischer Nachweis exprimierter Proteine "Allgemeine Chemie", "Biochemie und Bioanalytik", "Gentechnik", "Angewandte Biotechnologie", "Mathematik und Biophysikalische Chemie", "Zellbiologie", "Bioinformatik"und "Fachenglisch" erteilt. 21. März

5 Kursinhalte des Modulkurses PROTEOMIK Proteinanalytik Quantitative Proteinanalyse (Extinktion bei 280nm, BCA, Bradford, Lowry) Chromatographische Nachweisverfahren für Aminosäuren (Dünnschicht Chromatographie) Sequenzierung von Proteinen Enzymanalytik Optisch-enzymatische Testverfahren (Hyperchromer Effekt, Bestimmung der Enzymaktivität für Ribonuklease A und T1, Bestimmung der Enzymaktivität von Alkoholdehydrogenase aus Hefe, Bestimmung der Enzymaktivität von Lysozym) Zweidimensionale Gelelektrophorese Isolierung und Charakterisierung von Proteinen Immunologische Nachweisverfahren o Western-Blot im SemiDry-Verfahren o Western-Blot im Tankverfahren o ELISA Chromatographische Verfahren o High Performance Liquid Chromatography (HPLC) Umkehrphasen Chromatographie Ionenaustauschchromatographie Gelpermeationschromatographie) o Hochauflösende Dünnschicht Chromatograpie (HPTLC) Proteinbiosynthese in vitro Nutzung von Protein- und Proteinstruktur -Datenbanken im Internet Expressionsanalyse "Biochemie", "Bioanalytik", "Allgemeine und Organische Chemie", "Mathematik für das Labor", "Biophysikalische Chemie", "Zellbiologie", "Bioinformatik" und "Fachenglisch" erteilt. 21. März