ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA im deutscen Neugeborenen-Screening r. Micel Bredeöft Synlb MVZ Weiden GmbH
Inlt der Studie: Smmeln von Screening-ten versciedener deutscer Screening-Lbors im Bereic Acylcrnitine und Vergleic der ifferenzierungskpzität potenziell dignose-relevnter Prmeter nc Vorbild der tenbnk Region 4 Stork Smmeln von Konfirmtionsdten zu bestätigten Fällen von MCA und VLCA sowie Vergleic von Art und Verteilung Untersucung der gesmmelten ten in Hinblick uf Gemeinsmkeiten und Untersciede Ziel: Bildung einer iskussionsgrundlge für Stndrdisierung im Bereic der ignosestellung MCA / VLCA
tenbsis der Studie: Sieben deutsce Screening-Lbors mit c. 400.000 Screenings / Jr Tndem-MS-ten der Acylcrnitine bestätigter Fälle und der Normlpopultion Angben zu Art und Ergebnis der Bestätigung Insgesmt ten zu 117 MCA und 34 VLCA
Teil 1: ifferenzierungskpzität der Tndem-MS-Prmeter Grundlge: tenbnk Region 4 Stork ttp://www.clir-r4s.org/ Normierung der Auffälligen- und Normlpopultion uf den Medin der Normlpopultion und dekdisc-logritmisce rstellung direkter Vergleic untersciedlicer Prmeter versciedener Lbors in einer grfiscen Mtrix möglic
Beispiel 1
Beispiel 2
Möglice Kritikpunkte: merere Einstellungen für MCA (MCA, MCA (et), MCA (mt)), zudem etws unübersictlic ngeordnet d nur True Positives, welce ten z.b. in MCA (et)? Merkmlsträger? Gefr der Verwässerung" der Werte Wertelge versciedener Lbors mit untersciedlicer Messtecnik versciebt die Grenzen der Gesmtdrstellung
Lbor A MCA 00 0 1 0,1 0,01 0,001
Lbor B MCA 00 0 1 0,1 0,01 0,001
Lbor C MCA 00 0 1 0,1 0,01 0,001
Lbor MCA 00 0 1 0,1 0,01 0,001
Lbor F MCA 00 0 1 0,1 0,01 0,001
Beispiel 3
Beispiel 4
Lbor A VLCA 00 0 1 0,1 0,01 0,001
Lbor B VLCA 00 0 1 0,1 0,01 0,001
Lbor C VLCA 00 0 1 0,1 0,01 0,001
Lbor VLCA 00 0 1 0,1 0,01 0,001
Lbor E VLCA 00 0 1 0,1 0,01 0,001
Lbor F VLCA 00 0 1 0,1 0,01 0,001
Fzit: innerlb eines Lbors rstellung der Identifizierungskpzität einzelner Prmeter möglic Identifizierung potenzieller Zustzprmeter zwiscen versciedenen Lbors direkter Vergleic der Prmeter möglic möglicer Einfluss durc z.b. messtecnisce etils erkennbr
Teil 2: Konfirmtionsdignostik Untersciede / Gemeinsmkeiten Grundlge: Informtionen / ten übermittelt von den Screening-Lbors bei MCA z.b. - Verlufskontrolle - Orgnisce Säuren - Molekulrgenetik bei VLCA z.b. - Verlufskontrolle - Rest-Enzymktivität - Molekulrgenetik
Verteilung nc dignostiscer Metodik: Anteil ignostikmetode je Lbor bei MCA 0 0 0 0 0 80 80 80 68 73 78 71 Lbor A (14 Fälle) 60 40 20 0 57 57 56 45 40 29 18 18 9 11 8 9 0 0 Anteil KK [%] Anteil Genetik [%] Anteil Enzymtik [%] Anteil OS [%] Lbor B (22 Fälle) Lbor C (11 Fälle) Lbor (11 Fälle) Lbor F (25 Fälle) Lbor G (9 Fälle)
Verteilung nc dignostiscer Metodik: Anteil ignostikmetode je Lbor bei VLCA 0 0 0 0 0 0 0 80 83 80 75 75 75 Lbor A (2 Fälle) 60 40 50 44 Lbor B (4 Fälle) Lbor C (5 Fälle) Lbor (1 Fll) Lbor E (9 Fälle) 25 Lbor F (12 Fälle) 20 0 0 0 0 0 Anteil KK [%] Anteil Genetik [%] Anteil Enzymtik [%]
M C A V e r l u f o c 1 Werte für Mensc, Tier und Umwelt MoCO C8 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 5 0 zeitlicer Verluf C8 Erstkrte --> Kontrollkrte (MoCO) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 11 12 13 14 15 16 Blutentnmezeit [Tge] ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015 Fll1 - c-et Fll2 - c-et Fll3 - om Fll4 - om Fll5 -??? Fll6 - om Fll7 -??? Fll8 - c-et Fll9 - c-et Fll - et?, c-et? Fll11 - c-et Fll12 - c-et Fll13 - om Fll14 -??? Fll15 - c-et Fll16 - c-et Fll17 - om Fll18 - c-et Fll20 -??? Fll21 -??? Fll23 - om Fll24 - c-et Fll25 - om Fll26 -??? Fll27 -??? Fll28 -??? Fll29 - c-et Fll30 -??? CutOff --> MoCO = 1 Fll31 - et Fll32 - et
M C A V e r l u f o c 2 Werte für Mensc, Tier und Umwelt 60 zeitlicer Verluf C8 Erstkrte --> Kontrollkrte (MoCO) Fll1 - c-et 55 Fll5 -??? 50 Fll7 -??? 45 Fll12 - c-et 40 Fll13 - om 35 Fll15 - c-et MoCO C8 30 25 20 15 5 Fll16 - c-et Fll18 - c-et Fll20 -??? Fll21 -??? Fll26 -??? 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 11 12 13 14 15 16 Blutentnmezeit [Tge] Fll29 - c-et CutOff --> MoCO = 1 ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
M C A V e r l u f o c 3 Werte für Mensc, Tier und Umwelt zeitlicer Verluf C8 Erstkrte --> Kontrollkrte (MoCO) 60 Fll1 - c-et 55 50 Fll12 - c-et 45 40 Fll13 - om MoCO C8 35 30 25 Fll15 - c-et Fll16 - c-et 20 15 Fll18 - c-et 5 Fll29 - c-et 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 11 12 13 14 15 16 Blutentnmezeit [Tge] CutOff --> MoCO = 1 ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
M C A V e r l u f o c 1 n c M u t t i o n Werte für Mensc, Tier und Umwelt MoCO C8 32 30 28 26 24 22 20 18 16 14 12 8 6 4 2 0 zeitlicer Verluf C8 Erstkrte --> Kontrollkrte (MoCO) differenziert nc Muttionsrt Fll3 - om K329E / K329E Fll4 - om K329E / K329E Fll6 - om K329E / K329E Fll13 - om K329E / K329E Fll17 - om K329E / K329E Fll23 - om K329E / K329E Fll25 - om K329E / K329E Fll1 - c-et K329E / Y67H Fll2 - c-et K329E / Y67H Fll8 - c-et K329E / IVS5+1delG Fll9 - c-et K329E / Y67H Fll11 - c-et, keine etils Fll12 - c-et K329E / Y67H Fll15 - c-et K329E / Y158H Fll16 - c-et K329E / Y67H Fll18 - c-et p.c116y / p.t117t Fll24 - c-et K329E / c.388-19t>a Fll29 - c-et, keine etils Fll34 - et Y67H 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Blutentnmezeit [Tge] Fll35 - et, keine etils Fll31 - NEG - eterozygot K329E Fll32 - NEG - eterozygot c.219t>a Fll33 - NEG - eterozygot K329E CutOff --> MoCO = 1 ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
M C A V e r l u f o c 2 n c M u t t i o n Werte für Mensc, Tier und Umwelt MoCO C8 32 30 28 26 24 22 20 18 16 14 12 8 zeitlicer Verluf C8 Erstkrte --> Kontrollkrte (MoCO) differenziert nc Muttionsrt Fll13 - om K329E / K329E Fll1 - c-et K329E / Y67H Fll9 - c-et K329E / Y67H Fll12 - c-et K329E / Y67H Fll15 - c-et K329E / Y158H Fll16 - c-et K329E / Y67H Fll18 - c-et p.c116y / p.t117t Fll29 - c-et, keine etils Fll34 - et Y67H Fll35 - et, keine etils 6 4 2 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Blutentnmezeit [Tge] Fll31 - NEG - eterozygot K329E Fll32 - NEG - eterozygot c.219t>a Fll33 - NEG - eterozygot K329E CutOff --> MoCO = 1 ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
M C A V e r l u f o c 3 n c M u t t i o n Werte für Mensc, Tier und Umwelt 16 zeitlicer Verluf C8 Erstkrte --> Kontrollkrte (MoCO) differenziert nc Muttionsrt Fll13 - om K329E / K329E 14 12 Fll1 - c-et K329E / Y67H Fll9 - c-et K329E / Y67H Fll12 - c-et K329E / Y67H 13 Fll15 - c-et K329E / Y158H MoCO C8 8 9 15 Fll16 - c-et K329E / Y67H Fll29 - c-et, keine etils 6 Fll34 - et Y67H 4 12 1 Fll35 - et, keine etils 16 Fll31 - NEG - eterozygot K329E 2 0 32 34 35 29 33 31 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Blutentnmezeit [Tge] Fll32 - NEG - eterozygot c.219t>a Fll33 - NEG - eterozygot K329E CutOff --> MoCO = 1 ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
V L C A V e r l u f o c 1 Werte für Mensc, Tier und Umwelt 20 18 16 14 12 zeitlicer Verluf C14:1 Erstkrte --> Kontrollkrte (MoCO) Fll1 - % Fll2-0.6% Fll3-8% Fll4-17% Fll6-4% Fll7 -??? (Bruder Fll6) Fll8-6% Fll9-8% Fll11-19% Fll12-8% Fll13 - % MocO C14:1 8 6 4 2 Fll14-3% Fll15-8% Fll16-0% CutOff MoCO = 1 Fll17 -??? Fll18-6% Fll19-3% Fll20-27% Fll21 -??? Fll22-19% Fll23-0% 0 0 2 4 6 8 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 Blutentnmezeit [Tge] Fll24-11% Fll25 -??? Fll26-7% ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
V L C A V e r l u f o c 1 n c M u t t i o n Werte für Mensc, Tier und Umwelt 12 8 zeitlicer Verluf C14:1 Erstkrte --> Kontrollkrte (MoCO), differenziert nc Muttionsrt Fll17 -??? - omozygot c.848 T>C Fll21 -??? - omozygot c.848 T>C Fll1 - % - compound eterozygot Fll8-6% - compound eterozygot Fll9-8% - compound eterozygot MocO C14:1 6 4 2 Fll11-19% - compound eterozygot Fll18-6% - compound eterozygot Fll19-3% - compound eterozygot Fll22-19% - compound eterozygot Fll23-0% - compound eterozygot Fll26-7% - compound eterozygot Fll20-27% - eterozygot c.1322 G>A 0 0 2 4 6 8 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 Blutentnmezeit [Tge] CutOff MoCO = 1 ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
C14:1 der Erstkrte--> Enzymktivität 40 35 30 Enzymktivität [%] 25 20 15 R² = 0,1879 C14:1 der EK C14:1 der EK k.a. Aktivität MoCO=1 Aktivität=% Poly. (C14:1 der EK) 5 0 0 5 15 20 C14:1 MoCOs
40 C14:1 der Kontrollkrte--> Enzymktivität Enzymktivität [%] 35 30 25 20 15 5 0-5 R² = 0,2856 0 5 15 20 C14:1 MoCOs C14:1 der KK C14 der EK k.a. Aktivität MoCO=1 Aktivität=% Poly. (C14:1 der KK)
M C A C 8 n c M u t t i o n l i n e r 1 Werte für Mensc, Tier und Umwelt C8 Erstkrte --> Muttionsrt 0 90 80 70 MoCO C8 EK 60 50 40 POS omozygot POS compound-eterozygot 30 20 0 0 1 2 3 4 Blutentnmezeit EK [Tge] ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
M C A C 8 n c M u t t i o n l i n e r 2 Werte für Mensc, Tier und Umwelt C8 Erstkrte --> Muttionsrt 0 90 80 70 MoCO C8 EK 60 50 40 POS omozygot POS compound-eterozygot POS eterozygot 30 20 0 0 1 2 3 4 Blutentnmezeit EK [Tge] ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
M C A C 8 n c M u t t i o n l i n e r 3 Werte für Mensc, Tier und Umwelt C8 Erstkrte --> Muttionsrt 0 90 80 70 MoCO C8 EK 60 50 40 POS omozygot POS compound-eterozygot POS eterozygot NEG eterozygot NEG keine Genetik 30 20 0 0 1 2 3 4 Blutentnmezeit EK [Tge] ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
M C A C 8 n c M u t t i o n L O G 1 Werte für Mensc, Tier und Umwelt C8 Erstkrte --> Muttionsrt 0 MoCO C8 EK POS omozygot POS compound-eterozygot POS eterozygot NEG eterozygot NEG keine Genetik 1 0 1 2 3 4 0 Blutentnmezeit EK [Tge] ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
M C A C 8 n c M u t t i o n L O G 2 Werte für Mensc, Tier und Umwelt C8 Erstkrte --> Muttionsrt MoCO C8 EK 1 0 1 2 3 4 POS eterozygot NEG eterozygot NEG keine Genetik 0 Blutentnmezeit EK [Tge] ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
M C A T M S - O r g. S ä u r e n Werte für Mensc, Tier und Umwelt 0 C8 Erstkrte --> Org. Säuren (pos. / neg.) MoCO C8 EK OS (pos) OS (neg) 1 0 1 2 3 4 5 6 7 Blutentnmezeit EK [Tge] ten zu Screening und Bestätigung von MCA und VLCA 22. Jrestgung der GNS 20.06.2015
Fzit: ie Anwendung von Kontrollkrten ls Konfirmtionsdignostik bei MCA und VLCA ist in den Screening-Lbors ser eterogen verteilt. ten verdeutlicen, dss unuffällige Verlufskontrollen keinen siceren Rückscluss uf Vorndensein / Abweseneit der Zielkrnkeiten zulssen. ie Aussgekrft der Bestimmung Orgniscer Säuren bei MCA- Verdct sceint reltiv begrenzt. Bendlung eterozygoter Merkmlsträger sceint noc nict klr geregelt eindeutige Kriterien der ignosestellung werden benötigt. Popultionsbsierte Grenzwerte (z.b. Enzymktivität bei V.. VLCA) sollten ten-gestützt klrer definiert werden. Eine grundlegende Stndrdisierung der ignosestellung sollte ds Ziel einer objektiven Fkten-bsierten iskussion sein.
Unser nk get n die Verntwortlicen und Mitrbeiter der beteiligten deutscen Screening-Lbors us Mgdeburg, resden, Berlin, Greifswld, Heidelberg und Hnnover Ein besonderes nkescön für die oft rsend scnelle Hilfe n Sbine Rönicke Mrin Stopsck Jennette Klein Corneli Müller Gwendolyn Grmer irk Kolmüller Ute Holtkmp Und ntürlic (lst but not lest)
ein extr-großes ANKE SCHÖN n unser Neugeborenen-Screening-Tem der Synlb in Weiden
sowie n Sie: VIELEN ANK FÜR IE AUFMERKSAMKEIT