Stolpersteine in der serologischen Routinediagnostik des Rindes im peripartalen Zeitraum

Transkript

1 Stolpersteine in der serologischen Routinediagnostik des Rindes im peripartalen Zeitraum

2 Einführung wie sind wir auf das Thema gestoßen Versuchsgruppe mit Ergebnissen Einzeltierergebnisse Fragen und Literatur Walraph

3 Einführung we observed seroconversion or seronegativization events in a total of 34.3% of the multiparous cows under investigation and a significant decline of the antibody score during dry period. 3

4 Einführung Da ist was falsch Laborfehler oder Chargenwechsel? Telefonate mit kompetenten Personen Ein Rind kann es sich nicht leisten, seine eigene humorale Abwehr im peripartalen Zeitraum aufzugeben Suche nach Literatur Wiederholung des Versuchsansatzes 4

5 Versuchsgruppe 10 Tiere aus einer endemisch Coxiellen durchseuchten, nicht Coxiella geimpften Herde selektiert nach Reaktivität im indirekten Q Fieber ELISA 4 über 100% ber. OD - starkreaktiv 4 zwischen 30 und 100% ber. OD - mittelreaktiv 2 Tiere waren negativ. Alle Tiere BVDV geimpft. Die Cox. - negativen Tiere blieben negativ (wahrscheinlich keine zusätzliche Infektion in der Gruppe) Interessant für spätere Analysen sind die Coxiella mittelreaktiven Tiere Starkreaktive liegen außerhalb des Linearitätsbereiches des ELISA, so dass qualitative Änderungen geringer ausfallen Walraph

6 Versuchsgruppe LOM 6

7 Versuchsgruppe LOM 7

8 Versuchsgruppe Externkennung Tieralter in Monaten Kalbung Kalbedatum i.d. Regel 1 x wöchentlich beprobt vom bis zum Blutungsabstand d, ab d Die Proben wurden im Rahmen des herdenspezifischen Stoffwechselmonitorings genommen. 8

9 Verwendete Diagnostika IDEXX Q-Fever Antibody IDEXX BVDV Total Ab IDEXX IBR gb X3 IDEXX Trachitest Serum screening ID Screen Schmallenberg Virus Indirekt ID Screen BVD p80 SNT BVDV auf MDBK mit Paplitz SNT Schmallenberg auf BHK21 mit FLI-Isolat BH80/11-4 9

10 Q-Fieber Antikörperkinetik Untersuchungen in der Tagesroutine nahe am Entnahmezeitpunkt Geburtszeitraum LOM Cut off cox 10

11 Q-Fieber Antikörperkinetik im Mittel Ber. OD 11

12 BVDV Antikörperkinetik Untersuchungen in der Tagesroutine nahe am Entnahmezeitpunkt Geburtszeitraum LOM Cut off BVDV 12

13 BVDV Antikörperkinetik im Mittel Ber. OD 13

14 Einzeltierergebnisse Q Fieber und BVDV Einzeltieruntersuchungen erfolgten als WDH in einer Extraserie alle Verlaufsproben in einem Ansatz Tier mit Änd. der qualitativen Bewertung BVDV positiv negativ- positiv Q- Fieber positiv grenzwertigpositiv 14

15 Einzeltierergebnisse Q Fieber und BVDV Tier mit Änd. der qualitativen Bewertung Q- Fieber positiv negativ- positiv 15

16 Wie sind die Zeitfenster? 3-5 Wochen präpartal diagnostischer Peak im indirekten ELISA Danach deutlicher Reaktivitätsabfall bis zur Kalbung Erholungsphase 3-4 (5) Wochen postpartal Individuelle Unterschiede Verkürzung oder Verlängerung der Phasen, Stärke des Abfalls sind wahrscheinlich 16

17 Wie sind die Zeitfenster? Externkenn ung Kalbedatum Max Q F Wochen a.p. max BVD Wochen a.p. Q-Fieber normal Wochen p.p. BVD normal Wochen p.p Jul. 3,5 20. Jul. 2,5 23. Aug. 2,5 31. Aug. 3, Jul. 2,5 13. Jul. 3,5 16. Aug Sep Jul Jul Aug Sep Jul Jul Sep Sep Jul Jul Sep Jul Sep Jul Jul Sep Aug Jul. 3,5 20. Jul. 3,5 23. Aug. 1,5 31. Aug. 2, Jul. 3,5 6. Sep. 4 17

18 Einzeltierergebnisse BVDV - Tests Tier mit Änd. der qualitativen Bewertung BVDV positiv negativ - positiv p80 Blocking ELISA Serumverd. 1/4 18

19 Einzeltierergebnisse BVDV - Tests Tier mit Änd. der qualitativen Bewertung BVDV positiv negativ - positiv p80 Blocking ELISA Serumverd. 1/4 19

20 Einzeltierergebnisse Indirekte ELISA Tier (BHV1- Impftier) in 3 indirekten ELISA mit ähnlichem Verlauf Serumverdünnung im BHV1 ELISA 1/70 20

21 Einzeltierergebnisse BHV1 -Tests Tier in BHV1 Vollvirus indirekt und gb- Blocking ELISA Serumverdünnung 1/70 21

22 Einzeltierergebnisse indirekte ELISA Tier (BHV1- Impftier) in 3 indirekten ELISA mit ähnlichem Verlauf Serumverdünnung im BHV1 ELISA 1/70 22

23 Einzeltierergebnisse BHV1 -Tests Tier in BHV1 Vollvirus indirekt und gb- Blocking ELISA Serumverdünnung 1/70 23

24 Einzeltierergebnisse Schmallenberg Tier im indirekten Schmallenberg ELISA und SNT 24

25 Und was ist mit der Q-Fieber KBR? 25

26 Wo liegt die Ursache? Marco Herr / Promotion Gießen

27 Was zeigen die Konjugate an? «Das Konjugat, das wir im Q-Fieber Test verwenden, hat die höchste Affinität zu IgG1, erkennt aber auch alle anderen IgG-Klassen beim Rind. IgM und IgA werden nicht erkannt.» «Das Konjugat im BVDV Total Ab Test erkennt nur bovines IgG und nicht IgG vom Schaf oder von der Ziege. Innerhalb der bovinen IgG- Klassen wird wieder IgG1 sehr gut erkannt.» 27

28 Literatur Beschreibung des Phänomens durch Bachofen et al für BVDV 2005 Kyaw et al. für Neospora caninum Detilleux et al.1995 Untersuchungen zu IgG peripartal Marco Herr Gießen 2009 Promotion zu Ig Konzentration peripartal Larson, Kendall Verschiebung der Serumproteine peripartal Abnahme von y1 und β2 im Serum sechs Wochen a.p. bis zur Geburt, dabei Erhöhung im Eutersekret (Larson) Reduktion des humoralen IgG1 um 62% ab 5. Woche a.p. (Detilleux) IgG im Kolostrum - IgG1 zu 81%, präpartal 31,6 mg/ml im Eutersekret 10,7 mg/ml im Serum (nach Herr 2009) 28

29 Fragen? Hinweise? Der peripartale Zeitraum des Rindes ist ein kritischer Zeitpunkt - auch in der serologischen Diagnostik Die Abnahme der IgG1 Konzentration im Serum ist beachtenswert Bei Bestandsuntersuchungen sollte möglichst auf die Untersuchung von TS Gruppen verzichtet werden Indirekte ELISA`s mit starker Ausrichtung auf IgG1 sind in dieser Zeit kontrainduziert Besonders zu beachten sind geringe oder mittlere Antikörperkonzentrationen, die zu einer Änderung der qualitativen Bewertung führen Vorsicht bei Serumpaaruntersuchungen - in diesem Zeitraum sind innerhalb von 14d erhebliche Verschiebungen möglich Die Wahl des richtigen Diagnoseverfahrens lässt uns nicht stolpern Ist der Rückgang der AK IgG 1 im Blut mit einem Protektivitätsverlust verbunden? 29

30 Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit Finanziell gestützt durch die sächsische Tierseuchenkasse Dank meinem Laborpersonal Quelle: Masterrind 30