Vergleichende Untersuchungen zur Pharmakokinetik von Triaminopyridinen und Triaminobenzolen
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- Adolf Fiedler
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1 Berichte aus der Pharmazie Arnd Karnatz Vergleichende Untersuchungen zur Pharmakokinetik von Triaminopyridinen und Triaminobenzolen Shaker Verlag Aachen 1997
2 1 EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG 1.1 TRIAMINOPYRIDINE UND TRIAMINOBENZOLE Suche nach neuen Arzneistoffen Flupirtin-maleat, Katadolon Synthese Strukturelle und physikochemische Eigenschaften ARZNEISTOFFPROFIL DES FLUPIRTINS Pharmakodynamische Eigenschaften Analgetische Aktivität und Wirkmechanismus Muskelrelaxierende und antikonvulsive Aktivität Antikonvulsive Wirkung Muskelrelaxierende Wirkung Andere pharmakodynamische Effekte Toleranzentwicklung und Mißbrauchspotential Pharmakokinetik des Flupirtins Methodik Resorption Verteilung im Organismus Elimination Biotransformation und metabolische Clearance des Flupirtins Tabellierte pharmakokinetische Kenndaten des Flupirtins Verträglichkeit und Arzneistoffinteraktionen Therapeutische Anwendung des Flupirtins Heutiger Stellenwert des Flupirtins in der Schmerztherapie 21
3 1.3 PHARMAKOKINETIK Verwendete pharmakokinetische Symbole Einleitung Definition und Bedeutung der Pharmakokinetik Physiologische Grundlagen Resorption Verteilung Biotransformation (metabolische Clearance) Ausscheidung (Exkretion) Kinetische und mathematische Grundlagen Pharmakokinetische Modelle Kompartiment-Modell(monophasisch) Kompartiment-Modell mit parallelen Eliminationswegen Bioverfiigbarkeit (AUC) Gesamtkörperclearance (Cltot) Kompartiment-Modell (biphasisch) ZIELSETZUNG DER EIGENEN ARBEIT 42 2 UNTERSUCHUNG DER PHARMAKOKINETIK VON TRIAMINO- PYRIDINEN UND TRIAMINOBENZOLEN IN DER MAUS EINLEITUNG GEWINNUNG DER PLASMAPROBEN Testsubstanzen und Chemikalien Testsystem Spezifikation 47 II
4 Auswahlkriterien für das Testsystem Kennzeichnung des Testsystems Bedingungen der Tierhaltung Dosierungsplan Art und Methode der Darreichung Dosis Darreichungsform Substanzapplikation Stabilität Injektionslösung Plasmaproben Blutentnahme und Plasmagewinnung Lagerung und Versand der Proben HPLC-ANALYTIK Substanzen HPLC-System Geräte HPLC-Säule Chromatographische Bedingungen Probenaufarbeitung Detektion der Substanzen Validierung der HPLC-Analytik Prüfung der Richtigkeit, Linearität, Wiederfindung, Empfindlichkeit, Bestimmungsgrenze, Stabilität und des Bestimmungsbereichs Kalibrierung, Bestimmungsbereich, Bestimmungsgrenze 55
5 ].2 Wiederfindungsrate Akzeptanzkriterien für Kalibrierungen und Bestimmungsgrenzen Prüfung der Selektivität Prüfung der Präzision ~ Stabilitätsproben BESTIMMUNG VON SUBSTANZ D Übersicht HPLC-System Probenaufarbeitung Detektion der Substanzen Durchführung, Validierung und Auswertung zu D Kalibrierung und Bestimmungsbereich Wiederfindungsgeraden Prüfung der Selektivität Prüfung der Präzision Stabilitätsprüfung Bestimmungsgrenze Ergebnisse Anhang BESTIMMUNG VON SUBSTANZ D Übersicht HPLC-System Probenaufarbeitung Detektion der Substanzen 75 IV
6 2.5.5 Durchführung, Validierung und Auswertung zu D Kalibrierung und Bestimmungsbereich Wiederfindungsgeraden Prüfung der Selektivität Prüfung der Präzision Stabilitätsprüfung Bestimmungsgrenze Ergebnisse Anhang BESTIMMUNG VON SUBSTANZ D Übersicht HPLC-System Probenaufarbeitung Detektion der Substanzen Durchführung, Validierung und Auswertung zu D Kalibrierung und Bestimmungsbereich Wiederfindungsgeraden Prüfung der Selektivität Prüfung der Präzision Stabilitätsprüfung Bestimmungsgrenze Ergebnisse Anhang 102 V
7 2.7 BESTIMMUNG VON SUBSTANZ D Übersicht HPLC-System Probenaufarbeitung / Detektion der Substanzen Durchführung, Validierung und Auswertung zu D Kalibrierung und Bestimmungsbereich Wiederfindungsgeraden Prüfung der Selektivität Prüfung der Präzision Stabilitätsprüfung Bestimmungsgrenze Ergebnisse Anhang BESTIMMUNG VON SUBSTANZ D Übersicht HPLC-System Probenaufarbeitung Detektion der Substanzen Durchführung, Validierung und Auswertung zu D Kalibrierung und Bestimmungsbereich Wiederfindungsgeraden Prüfung der Selektivität Prüfung der Präzision 129 VI
8 Stabilitätsprüfung Bestimmungsgrenze Ergebnisse Anhang PROTEINBINDUNG DER TRIAMINOPYRIDINE UND TRIAMINO- BENZOLE EINLEITUNG Bedeutung der Proteinbindung Auswahl der Methode und Zielsetzung 3.2 MATERIAL UND METHODEN Materialien Geräte Validierung und Durchführung der Methode Phosphatpuffer Mäuseplasma Albuminlösung Kalibrierung Durchführung Berechnung der Proteinbindung 3.3 ERGEBNISSE DER IN VITRO PROTEINBINDUNG Flupirtinmaleat (D-09998) D D VII
9 3.3.4 D D DISKUSSION DER ERGEBNISSE 4 KORRELATIONSANALYSE UND DISKUSSION DER PHARMAKO- KINETISCHEN DATEN 160_ 4.1 EINLEITUNG ZUSAMMENFASSUNG DER PHARMAKOKINETISCHEN DATEN KORRELATIONSANALYSE MIT DEN PHARMAKOKINETISCHEN DATEN Hard- und Software Bewertung des Datensatzes Anpassung des Datensatzes für die Korrelationsanalyse Ergebnisse der Korrelationsanalyse, Regressionsanalyse und der cross validation" DISKUSSION DER KORRELATIONSANALYSE DISKUSSION DER PHARMAKOKINETISCHEN DATEN VERGLEICHENDE BETRACHTUNG DER PHARMAKOKINETIK VON FLUPIRTIN UND DES-AZA-FLUPIRTIN IN MÄUSEN MIT PRÄKLINISCHEN STUDIEN IN DER RATTE Vergleich der Pharmakokinetik des Flupirtins (D-09998) in der Maus versus Ratte Vergleich der Pharmakokinetik von D in der Maus versus D in der Ratte ZUSAMMENFASSUNG DER STUDIENERGEBNISSE 177 VIII
10 5 BIOTRANSFORMATION DES DES-AZA-FLUPIRTINS EINLEITUNG UND ZIELSETZUNG MATERIAL UND METHODEN Gewinnung der Plasmaproben Ort und Zeitpunkt der In-vivo-Studie Prüfsubstanz und Chemikalien Tierspezies, Anzahl und Haltung der Tiere Dosierungsplan und Probengewinnung Dosis und Dosisformulierung Probennahme und Plasmagewinnung Lagerstabilitätsproben Versand der Proben Untersuchung der Plasmaproben Substanzen und Chemikalien Geräte für die Probenaufarbeitung HPLC-Analytik Geräte HPLC-Säule Chromatographische Bedingungen 184 S A Detektion der Substanzen Untersuchung zur enzymatischen Spaltung der Metaboliten Behandlung der Plasmaproben mit 1 N HCL LC-MS-Kopplung Probenaufarbeitung Probenaufarbeitung für die HPLC-Analyse Aufkonzentrierung der Plasmaproben 187 IX
11 5.3 ERGEBNISSE UND DISKUSSION HPLC-Analytik Validierung, Kalibrierung, Wiederfindung und Bestimmungsgrenze Stabilitätsstandards Erhaltene Chromatogramme / Zumischung der Vergleichssubstanzen Ergebnisse der Spaltungsversuche Enzymatische Behandlung Hydrolytische Behandlung Untersuchung der Plasmaproben mit LC-MS-Kopplung Ausgangspunkt Diskussion der Methodik Erhaltene Chromatogramme und Spektren Zusammenfassung der Ergebnisse 6 ZUSAMMENFASSUNG 7 LITERATURVERZEICHNIS
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