Influenzaviren: Aktuelle Untersuchungen zur anti-viralen Wirkung von Senfölen aus Kapuzinerkresse und Meerrettich
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- Hannelore Irmela Bösch
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1 JUSTUS-LIEBIG- UNIVERSITÄT GIESSEN FACHBEREICH MEDIZIN Influenzaviren: Aktuelle Untersuchungen zur anti-viralen Wirkung von Senfölen aus Kapuzinerkresse und Meerrettich Stephan Pleschka Institut für Medizinische Virologie, Jutus-Liebig-Universität Gießen, Frankfurter Str. 107, D Giessen, Germany München,
2 Influenza-verursachte Übersterblichkeit in Deutschland Ø:
3 Influenza Virus Pandemien des 20ten Jahrhunderts H1N1? H7N7 H9N2 H1N1 H5N1? H2N2 H3N2 H1N1 H1N Spanische Grippe Mil. Tote 1957 Asiatische Grippe 3-4 Mil. Tote Russische Grippe HongKong Grippe > Tote >1 Mil. Tote Vogel Mexiko Grippe Grippe > Tote 3
4 Zugelassene Anti-Influenza Medikamente M2-Ion Kanal Blocker Amantadine Rimantadine Neuraminidase Inhibitoren Tamiflu (Oseltamivir) Relanza (Zanamivir) 4
5 Medizinischer Bedarf: There is an urgent need for new antivirals against influenza virus infections. Prof. Yoshihiro Kawaoka Robert-Koch Preisträger gute Verfügbarkeit - breite Aktivität - keine Resistenz 5
6 Senföle Senföle aus Kapuzinerkresse (Tropaeolum majus) und Meerrettich (Armoracia rusticana) 6
7 Senföle Die wirksamen Senföle liegen in den Pflanzen als Vorstufe sogenannte Glucosinolate vor Bei Verletzung der Pflanzenzellen werden zwei Stoffe, die bisher getrennt voneinander vorlagen, zusammengeführt: - das Enzym Myrosinase und die Glucosinolate Beim Zusammentreffen bilden sich die hochaktiven, scharf schmeckenden und anti-mikrobiell wirksamen Senföle. Biologische Bedeutung: der typische scharfe Geschmack dient in der Natur als Fraßschutz gegenüber Schädlingen Ebenso schützen die Senföle auch vor bakterieller Besiedelung [1] Als wirksame Inhaltsstoffe konnten bereits in den 50er Jahren die Senföle bestimmt werden: Benzylisothiocyanat 2-Phenylethylisothiocyanat Allylisothiocyanat [1] Aires, A. et. al. J Appl Microbiol 106, S (2009 ) 7
8 Kapuzinerkresse Wirksame Inhaltsstoffe Glucotropaeolin die Senfölvorstufe aus der Kapuzinerkresse Durch Myrosinase freigesetztes Benzylisothiocyanat Die inaktive Vorstufe Glucosinolat Das freie Senföl 8
9 Meerrettich Wirksame Inhaltsstoffe Sinigrin und Gluconasturtiin die Senfölvorstufen aus Meerrettich Durch Myrosinase freigesetzte Isothiocyanate: Allylisothiocyanat 2 Phenylethylisothiocyanat Myrosinase H 2 O Die inaktive Vorstufe Glucosinolat Das freie Senföl 9
10 Anti-Bakterielle Aktivität 2006 wurde in einer Studie am Universitätsklinikum Freiburg die antibakterielle Aktivität von einer Mischung von Senfölen aus Kapuzimerkresse und Meerrettich [2] untersucht. Abb. aus [3] Staphylococcus aureus (MRSA) 400 mg Kapuzinerkresse 160 mg Meerrettich Staphylococcus aureus (MRSA) Kontrolle 10 3 KBE [2] Conrad A. et. al., In vitro Untersuchungen zur antibakteriellen Wirksamkeit einer Kombination aus Kapuzinerkressenkraut und Meerrettichwurzel, Arzneim Forsch/Drug Res 56, S (2006) [3] Conrad A., Antimicrobial activity of Angocin Anti Infekt N a combination of nasturtium and horseradish, Kongress der Gesellschaft für Arzneipflanzenforschung, Graz
11 Ziele der Studie kontrollierte Untersuchung von Reinsubstanzen kontrollierte Untersuchungen mit aktuellen Methoden Abschätzung des anti-viralen Potentials gegen das pandemische IV 11
12 Viabilitäts-Testung auf A549 Zellen Allyl-Isothiocyanat: 37,9% Benzyl-Isothiocyanat: 50,0 % Phenylethyl-Isothiocyanat: 12,1% Lösung in Verdünnungen von 10-2 bis
13 Viabilitäts-Testung auf A549 Zellen 13
14 Viabilitäts-Testung auf A549 Zellen 14
15 Anti-virale Aktivität gegen das pandemische IV (I) Virus titers of A/Hamburg/04/09 (H1N1) infection (moi=0,01) on A549 cells, titered on MDCK-II cells, +/- Allyl-ITC Infectious titer of A/Hamburg/01/09 (H1N1) infection (moi=0,01) on A549 cells, +/- Allyl-ITC 8,00E Virustiter [FFU/ml] 7,00E+07 6,00E+07 5,00E+07 4,00E+07 3,00E+07 2,00E+07 1,00E+07 infectious titer [virus ctrl. set to 100%] ,00E+00 9h 24h 36h time p.i. 0 9h 24h 36h h p.i. Virus ctrl A 10e-4 A 10e-5 A 10e-7 A 10e-9 Virus ctrl A 10e-4 A 10e-5 A 10e-7 A 10e-9 15
16 Anti-virale Aktivität gegen das pandemische IV (II) Virus titers of A/Hamburg/04/09 (H1N1) infection (moi=0,01), on A549 cells, titered on MDCK-II cells, +/- Benzyl-ITC Infectious titer of A/Hamburg/01/09 (H1N1) infection (moi=0,01) on A549 cells, +/- Benzyl-ITC Virustiter [FFU/ml] 8,00E+07 7,00E+07 6,00E+07 5,00E+07 4,00E+07 3,00E+07 2,00E+07 1,00E+07 infectious titer [virus ctrl. set to 100%] ,00E+00 9h 24h 36h time p.i. 0 9h 24h 36h h p.i. Virus ctrl B 10e-4 B 10e-5 B 10e-7 B 10e-9 Virus ctrl B 10e-4 B 10e-5 B 10e-7 B 10e-9 16
17 Anti-virale Aktivität gegen das pandemische IV (III) Virus titers of A/Hamburg/04/09 (H1N1) infection (moi=0,01) on A549 cells, titered on MDCK-II cells, +/- Phenylethyl-ITC Infectious titer of A/Hamburg/01/09 (H1N1) infection (moi=0,01) on A549 cells, +/- Phenylethyl-ITC 8,00E Virustiter [FFU/ml] 7,00E+07 6,00E+07 5,00E+07 4,00E+07 3,00E+07 2,00E+07 1,00E+07 infectious titer [virus ctrl. set to 100%] ,00E+00 9h 24h 36h time p.i. 0 9h 24h 36h h p.i. Virus ctrl P 10e-4 P 10e-5 P 10e-7 P 10e-9 Virus ctrl P 10e-4 P 10e-5 P 10e-7 P 10e-9 17
18 Zusammenfassung 1. Verdünnungen der einzelnen Senföle aus Kapuzinerkresse und Meerrettich zeigen in der Zellkultur geringe bis keine Toxizität. 2. Die Vermehrung des pandemischen Influenzavirus (H1N1) in menschlicher Lungenzellkultur wird um ca. 90% gehemmt. 3. Die Hemmung tritt bei Konzentrationen ein, die mehrere Ordnungen niedriger liegen als die empfohlenen Dosis für die orale Verwendung. 4. Weitere Untersuchungen zu der Anwendung der Senföle gegen humane Influenzaviren wurden begonnen. 18
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