Aminosäurenanalytik. Probenvorbereitung Eiweißfällung, Oxidation und Hydrolyse Karl-Heinz Jansen SYKAM CHROMATOGRAPHIE
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1 Aminosäurenanalytik Probenvorbereitung Eiweißfällung, Oxidation und Hydrolyse Karl-Heinz Jansen SYKAM CHROMATOGRAPHIE
2 Proteinfällung 2
3 Proteinfällung 3
4 Proteinfällung 4
5 Proteinfällung 5
6 Proteinfällung 6
7 Proteinfällung 7
8 Proteinfällung 8
9 Proteinfällung 9
10 Proteinfällung 10
11 Proteinfällung IS NorLeu im SSA 11
12 12
13 13
14 14
15 15
16 16
17 17
18 18
19 19
20 20
21 21
22 22
23 23
24 24
25 25
26 NorLeu 107,73 109,01 112,12 107,41 109,56 111,76 112,26 114,45 109,74 113,23 110,79 2,25 2% 26
27 27
28 + + CYS-Ox 46,73 54,86 50,58 45,64 51,03 43,36 45,13 48,85 CYS 0,38 0,38 0,25 0,26 0,19 0,43 0,32 0,38 Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h 48,27 3,78 8% CYS 10,22 8,98 6,73 7,53 2,90 0,49 0,18 0,18 0,32 0,08 26% 4,65 4,19 90% 28
29 + + MET-Ox 35,42 39,03 38,05 37,06 37,71 37,77 41,30 39,79 MET 0,75 0,45 0,15 0,54 0,91 0,67 0,70 0,67 Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h 38,27 1,78 5% MET 31,52 26,51 24,69 29,58 26,89 25,12 26,66 28,59 0,61 0,23 38% 27,44 2,31 8% 29
30 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h ASP 162,77 188,42 188,19 159,79 174,15 166,40 166,72 173,22 172,46 10,89 6% ASP 148,07 138,05 139,88 149,10 148,96 145,21 146,12 140,36 144,47 4,42 3% 30
31 + + THR 61,24 69,96 61,91 72,10 66,53 68,65 72,12 69,69 SER 77,24 89,21 81,43 84,87 86,33 91,90 107,29 88,21 Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h 67,78 4,23 6% 88,31 8,94 10% THR 70,30 63,48 62,69 68,19 67,70 65,70 60,02 64,58 SER 100,35 96,14 97,35 98,25 94,06 87,73 90,36 89,93 65,33 3,33 5% 94,27 4,52 5% 31
32 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h GLU PRO 315,62 20,77 356,78 22,02 342,25 23,59 345,64 21,65 341,12 26,82 340,58 25,72 346,41 23,28 316,36 23,90 338,10 23,47 14,57 2,04 4% 9%? GLU PRO 307,48 22,68 289,87 20,96 302,52 19,95 319,40 21,29 319,66 21,10 324,21 23,94 334,67 24,29 339,74 24,84 317,19 22,38 16,60 1,81 5% 8% 32
33 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h GLY ALA 126,63 106,75 141,19 121,28 139,35 120,16 134,57 111,74 134,57 116,52 132,60 112,35 137,05 115,24 129,59 109,72 134,44 114,22 4,85 5,03 4% 4%? GLY ALA 116,30 104,12 113,28 99,73 115,72 100,12 126,26 104,55 124,79 103,44 125,07 101,18 129,70 104,82 130,40 107,57 122,69 103,19 6,65 2,68 5% 3% 33
34 + + VAL 82,21 92,75 88,45 86,04 88,10 85,66 91,36 88,91 Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h 87,94 3,33 4% VAL 68,74 62,91 82,56 86,20 89,41 95,34 95,65 99,22? 85,00 13,10 15% 34
35 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h ILE LEU 68,44 131,98 71,22 137,75 72,16 141,99 67,86 132,84 70,14 136,29 72,87 141,12 75,13 138,83 73,70 135,27 71,44 137,01 2,53 3,62 4% 3% ILE LEU 56,27? 119,23 49,77 110,76 65,55 121,46 70,06 128,97 73,08 128,35 73,69 127,44 76,11 131,77 74,34 134,05 67,36 125,25 9,57 7,64 14% 6% 35
36 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h? TYR PHE HIS 28,47 68,16 48,14 32,57 74,63 53,77 26,44 71,73 53,92 31,16 68,18 42,99 32,16 69,37 45,14 29,05 69,30 50,05 43,30 76,01 46,84 38,16 69,50 48,24 32,66 70,86 48,64 5,54 2,99 3,85 17% 4% 8% TYR PHE HIS 41,54 61,64 39,35? 37,25 58,44 33,68 39,73 61,82 40,07 41,72 67,29 42,17 41,13 65,24 45,04 39,93 64,32 45,43 42,02 68,48 50,44 42,27 65,62 53,15 40,70 64,11 43,67 1,67 3,30 6,26 4% 5% 14% 36
37 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h LYS Ammonia ARG 97,41 277,02 79,59 87,60 244,60 71,27 94,72 277,44 78,01 100,43 284,47 80,68 98,24 296,84 80,11 99,20 306,74 78,61 102,25 328,50 82,00 105,40 303,14 76,95 98,16 289,84 78,40 5,34 25,07 3,29 5% 9% 4% LYS Ammonia ARG 99,39 283,44 81,47 110,92 315,36 90,29 108,01 311,29 90,52 102,17 300,17 84,84 104,56 298,76 85,70 103,34 291,48 83,42 106,79 294,13 89,72 101,37 284,28 85,06 104,57 297,36 86,38 3,81 11,58 3,40 4% 4% 4% 37
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