Aminosäurenanalytik. Probenvorbereitung Eiweißfällung, Oxidation und Hydrolyse Karl-Heinz Jansen SYKAM CHROMATOGRAPHIE

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1 Aminosäurenanalytik Probenvorbereitung Eiweißfällung, Oxidation und Hydrolyse Karl-Heinz Jansen SYKAM CHROMATOGRAPHIE

2 Proteinfällung 2

3 Proteinfällung 3

4 Proteinfällung 4

5 Proteinfällung 5

6 Proteinfällung 6

7 Proteinfällung 7

8 Proteinfällung 8

9 Proteinfällung 9

10 Proteinfällung 10

11 Proteinfällung IS NorLeu im SSA 11

12 12

13 13

14 14

15 15

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17 17

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19 19

20 20

21 21

22 22

23 23

24 24

25 25

26 NorLeu 107,73 109,01 112,12 107,41 109,56 111,76 112,26 114,45 109,74 113,23 110,79 2,25 2% 26

27 27

28 + + CYS-Ox 46,73 54,86 50,58 45,64 51,03 43,36 45,13 48,85 CYS 0,38 0,38 0,25 0,26 0,19 0,43 0,32 0,38 Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h 48,27 3,78 8% CYS 10,22 8,98 6,73 7,53 2,90 0,49 0,18 0,18 0,32 0,08 26% 4,65 4,19 90% 28

29 + + MET-Ox 35,42 39,03 38,05 37,06 37,71 37,77 41,30 39,79 MET 0,75 0,45 0,15 0,54 0,91 0,67 0,70 0,67 Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h 38,27 1,78 5% MET 31,52 26,51 24,69 29,58 26,89 25,12 26,66 28,59 0,61 0,23 38% 27,44 2,31 8% 29

30 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h ASP 162,77 188,42 188,19 159,79 174,15 166,40 166,72 173,22 172,46 10,89 6% ASP 148,07 138,05 139,88 149,10 148,96 145,21 146,12 140,36 144,47 4,42 3% 30

31 + + THR 61,24 69,96 61,91 72,10 66,53 68,65 72,12 69,69 SER 77,24 89,21 81,43 84,87 86,33 91,90 107,29 88,21 Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h 67,78 4,23 6% 88,31 8,94 10% THR 70,30 63,48 62,69 68,19 67,70 65,70 60,02 64,58 SER 100,35 96,14 97,35 98,25 94,06 87,73 90,36 89,93 65,33 3,33 5% 94,27 4,52 5% 31

32 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h GLU PRO 315,62 20,77 356,78 22,02 342,25 23,59 345,64 21,65 341,12 26,82 340,58 25,72 346,41 23,28 316,36 23,90 338,10 23,47 14,57 2,04 4% 9%? GLU PRO 307,48 22,68 289,87 20,96 302,52 19,95 319,40 21,29 319,66 21,10 324,21 23,94 334,67 24,29 339,74 24,84 317,19 22,38 16,60 1,81 5% 8% 32

33 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h GLY ALA 126,63 106,75 141,19 121,28 139,35 120,16 134,57 111,74 134,57 116,52 132,60 112,35 137,05 115,24 129,59 109,72 134,44 114,22 4,85 5,03 4% 4%? GLY ALA 116,30 104,12 113,28 99,73 115,72 100,12 126,26 104,55 124,79 103,44 125,07 101,18 129,70 104,82 130,40 107,57 122,69 103,19 6,65 2,68 5% 3% 33

34 + + VAL 82,21 92,75 88,45 86,04 88,10 85,66 91,36 88,91 Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h 87,94 3,33 4% VAL 68,74 62,91 82,56 86,20 89,41 95,34 95,65 99,22? 85,00 13,10 15% 34

35 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h ILE LEU 68,44 131,98 71,22 137,75 72,16 141,99 67,86 132,84 70,14 136,29 72,87 141,12 75,13 138,83 73,70 135,27 71,44 137,01 2,53 3,62 4% 3% ILE LEU 56,27? 119,23 49,77 110,76 65,55 121,46 70,06 128,97 73,08 128,35 73,69 127,44 76,11 131,77 74,34 134,05 67,36 125,25 9,57 7,64 14% 6% 35

36 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h? TYR PHE HIS 28,47 68,16 48,14 32,57 74,63 53,77 26,44 71,73 53,92 31,16 68,18 42,99 32,16 69,37 45,14 29,05 69,30 50,05 43,30 76,01 46,84 38,16 69,50 48,24 32,66 70,86 48,64 5,54 2,99 3,85 17% 4% 8% TYR PHE HIS 41,54 61,64 39,35? 37,25 58,44 33,68 39,73 61,82 40,07 41,72 67,29 42,17 41,13 65,24 45,04 39,93 64,32 45,43 42,02 68,48 50,44 42,27 65,62 53,15 40,70 64,11 43,67 1,67 3,30 6,26 4% 5% 14% 36

37 + + Konzentrationen in nmol/1,25 mg Hydrolyse 10 h Hydrolyse 10 h Hydrolyse 48 h LYS Ammonia ARG 97,41 277,02 79,59 87,60 244,60 71,27 94,72 277,44 78,01 100,43 284,47 80,68 98,24 296,84 80,11 99,20 306,74 78,61 102,25 328,50 82,00 105,40 303,14 76,95 98,16 289,84 78,40 5,34 25,07 3,29 5% 9% 4% LYS Ammonia ARG 99,39 283,44 81,47 110,92 315,36 90,29 108,01 311,29 90,52 102,17 300,17 84,84 104,56 298,76 85,70 103,34 291,48 83,42 106,79 294,13 89,72 101,37 284,28 85,06 104,57 297,36 86,38 3,81 11,58 3,40 4% 4% 4% 37

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