Labor für molekulare Hämatologie und Onkologie Klinik I für Innere Medizin. Leistungsverzeichnis

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1 Labr für mlekulare Hämatlgie und Onklgie Klinik I für Innere Medizin Leistungsverzeichnis

2 Leistungsverzeichnis Erstellt: Elena Krämer Unterschrift: Datum: Geprüft: Prf. Dr. med. K.-A. Kreuzer Unterschrift: Datum: Freigegeben: Elena Krämer Unterschrift: Datum: Versinsnr.: 2 VA_35_ZQM_Leistungsverzeichnis Seite 1 vn 12

3 Inhalt 1 Zytmrphlgie Indikatinen: Material: Immunphäntypisierung Indikatinen: Myelprliferative Neplasien MDS Esinphilie Akute myelische Leukämie (AML) Akute lymphatische Leukämie (B-ALL/T-ALL) B-Zell-Nn Hdgkin Lymphm/Chrnische lymphatische Leukämie... 5 CLL-MRD T-Zell-Nn Hdgkin Lymphm Multiples Myelm Material: Mlekulargenetik Indikatinen: Myelprliferative Neplasien Esinphilie Myeldysplastische Syndrme Akute myelische Leukämie Akute lymphatische Leukämie B-Zell-Nn Hdgkin Lymphm/Chrnisch lymphatische Leukämie T-Zell-Nn Hdgkin Lymphm Plasmazellmyelm Mastzytse Stammzelltransplantatin Material: Tumrzytgenetik Indikatinen: Akute lymphatische Leukämie (ALL) Akute myelische Leukämie (AML) Myeldysplastisches Syndrm (MDS) Chrnisch myelmnzytäre Leukämie (CMML)... 9 Seite 2 vn 12

4 4.1.5 Myelprliferative Neplasien (MPN) B-Zell Nn-Hdgkin-Lymphme: B-NHL hne weitere Spezifikatin, Fllikuläres Lymphm (FL), Diffus grßzelliges B-Zell- Lymphm (DLBCL) Burkitt-Lymphm (BL), Marginalznen-Lymphme (MZL, ndales MZL, SMZL, MALT) Chrnisch lymphatische Leukämie (CLL) Mantelzelllymphm (MCL), Mnklnale B-Zell-Lymphzytse (MBL) Immunzytm / Lymphplasmzytisches Lymphm (LPL), Mnklnale Gammpathie, Mnklnale Gammpathie unklarer Signifikanz (MGUS), Multiples Myelm (MM) / Plasmzytm / Plasmazellleukämie bei IGH-Rearrangement zusätzlich: T-Zell Nn-Hdgkin-Lymphme T-NHL hne weitere Spezifikatin T-Prlymphzyten-Leukämie (T-PLL) Material: Seite 3 vn 12

5 Änderungshinweise: Punkt 3: Ergänzung des NGS 1 Zytmrphlgie Bei hämatlgischen Erkrankungen ist die Zytmrphlgie die Basis der Diagnstik. In diesem Bereich wird die Richtung für weitere sinnvlle Zusatzuntersuchungen ermittelt. Diese Zusatzuntersuchungen werden in den Bereichen der Immunphäntypisierung, der Mlekulargenetik und der Tumrzytgenetik durchgeführt. Im Bereich der Zytmrphlgie kmmen flgende Methden, entsprechend der Verdachtsdiagnse, zum Einsatz: - Panptische Färbung nach Pappenheim (Standartfärbung der Hämatlgie, kmmt bei allen Entitäten zum Einsatz) - Perxidase-Färbung (POX) - Perid-Säure-Schiffs-Reaktin (PAS) - Berliner-Blau-Reaktin - Tluidinblau - Esterase-Färbung (NE) 1.1 Indikatinen: - Akute Leukämien (ALL/AML) - Myeldysplastische Syndrme (MDS) - Myelprliferative Neplasien (MPN) - Lymphme (M. Hdgkin, Nn-Hdgkin-Lymphme, DLBCL, Multiples Myelm) - Andere hämatlgischen Erkrankungen (z.b Agranulzytse) - Karzinsen - Atypien in Ergüssen/Liqur - Veränderungen der Erythrzyten 1.2 Material: - Native Knchenmark- und/der periphere Blutausstriche - Knchenmark (EDTA) - Peripheres Blut (EDTA) - Körperhöhlenergüsse (Nativ der EDTA) Aszites Seite 4 vn 12

6 Pleura Perikard - Liqur (Nativ) - Brnchalveläre Lavage 2 Immunphäntypisierung Im Bereich Immunphäntypisierung werden die gemessenen Leukzyten anhand Ihrer zellulären Eigenschaften in Subppulatinen eingeteilt. Auffällige Immunphäntypen werden erkannt und können klassifiziert werden. Unser Labr verfügt über vllautmatische 4-Farb-Durchflusszytmeter für die Messung vn Immunstaten und 10-Farb-Durchflusszytmeter für die Abgrenzung maligner Zellppulatinen vn benignen/reaktiven Zellppulatinen. 2.1 Indikatinen: - Myelprliferative Neplasien - MDS - Esinphilie - Akute myelische Leukämie (AML) - Akute lymphatische Leukämie (B-ALL/T-ALL) - B-Zell-Nn Hdgkin Lymphm/Chrnische lymphatische Leukämie CLL-MRD - T-Zell-Nn Hdgkin Lymphm Auf Wunsch auch TCR V-Beta Charakterisierung* - Multiples Myelm - PNH - Immunstatus 2.2 Material: - Knchenmark (EDTA) - Peripheres Blut (EDTA) - Punktate (Nativ)* Aszites Pleura Seite 5 vn 12

7 Perikard - Liqur (Nativ)* - Brnchalveläre Lavage und peripheres Blut (Immunstatus) 3 Mlekulargenetik Der Bereich der Mlekulargenetik ist ein wichtiger Bestandteil der Diagnstik und Prgnseabschätzung im Bereich der Hämat-Onklgie. Diverse genetische Veränderungen lassen sich ausschließlich über mlekulargenetische Methden nachweisen. Die Bestimmung der minimalen Resterkrankung (MRD) hat einen hhen Stellenwert für die Überprüfung des Ansprechens vn Therapien und die Früherkennung vn Rezidiven. Als wichtige Ergänzung zur Chrmsmen- und FISH-Analyse ist die klassische und erweiterte mlekulargenetische Analytik aus der Hämat- Onklgie nicht mehr wegzudenken. 3.1 Indikatinen: Myelprliferative Neplasien - BCR-ABL1 Multiplex - BCR-ABL1 quantitativ - JAK2-V617F-Mutatin - JAK2-Exn12-Mutatinen* - MPL-W515-Mutatin* - CALR-Mutatinen* - KIT-D816-Mutatin* - ABL1-Mutatinen (TKI Resistenz)* - Panelsequenzierung* Esinphilie - FIP1L1-PDGFRA-Rearrangement* Myeldysplastische Syndrme - FLT3-ITD-Screening - NPM1-Screening - NPM1-Mutatin quantitativ - MLL-PTD-Screening Seite 6 vn 12

8 - MLL-PTD quantitativ - TP53-Mutatinen* - Panelsequenzierung* Akute myelische Leukämie - FLT3-TKD-Mutatin* - FLT3-ITD-Screening - NPM1-Screening - NPM1-Mutatin quantitativ - CEBPα-Mutatinen* - KIT-D816-Mutatin* - RUNX1-RUNX1T1 quantitativ - CBFβ-MYH11 quantitativ - PML-RARA quantitativ - MLL-PTD-Screening - MLL-PTD quantitativ - WT1 quantitativ - Panelsequenzierung* Akute lymphatische Leukämie - BCR-ABL1 quantitativ - WT1 quantitativ - E2A-PBX1 quantitativ - MLL-AF4 quantitativ B-Zell-Nn Hdgkin Lymphm/Chrnisch lymphatische Leukämie - TP53-Mutatinen* - IgHV-Mutatinsstatus* - BRAF-V600E/K-Mutatin - SOX11 quantitativ - CCND1 quantitativ - MYD88-L265P-Mutatin* - CXCR4-Mutatinen* T-Zell-Nn Hdgkin Lymphm - TCR-Rearrangement* - STAT3-Mutatinen* Seite 7 vn 12

9 3.1.8 Plasmazellmyelm - TP53-Mutatinen* Mastzytse - KIT-D816-Mutatin* Stammzelltransplantatin - Chimärismus* 3.2 Material: - Knchenmark (EDTA) - Peripheres Blut (EDTA) - Pleura - Liqur 4 Tumrzytgenetik Chrmsmen- und FISH-Analyse stellen die wesentlichen Techniken der Tumrzytgenetik bei der initialen Diagnstik hämat-nklgischen Erkrankungen dar. Die klassische Chrmsmenanalyse (CA), als die Erstellung eines Karytyps hat einen bedeutenden Anteil an der Bestimmung einer spezifischen Entität. In vielen Fällen stellt sie zudem einen entscheidenden Prgnse-Parameter dar. Mit Hilfe der Interphase-FISH-Analyse werden submikrskpische Veränderungen detektiert. Ebens wie bei der CA können hier Aberratinen vn wegweisender Bedeutung für prgnstische Einstufung detektiert werden. Bei Plasmazellerkrankungen, die eine niedrige In-vitr-Prliferatinsrate aufweisen, ist die Aussagekraft der Chrmsmenanalyse begrenzt. Hier kmmt der FISH-Analyse die entscheidende Bedeutung zu. Die CD138-psitiven Plasmazellen werden mittels zunächst MACS angereichert und anschließend der FISH analysiert. Zur Aufklärung kmplex aberranter Karytypen, wie sie nicht selten bei hämatlgischen Neplasien auftreten, wird die M-FISH-Analyse (Multi-Clr-FISH) eingesetzt, die jedes Chrmsm mit einer Seite 8 vn 12

10 eigenen, spezifischen Farbe markiert und s eine eindeutige Darstellung chrmsmaler Umbauten erlaubt. 4.1 Indikatinen: Akute lymphatische Leukämie (ALL) - Chrmsmenanalyse KMT2A (früher MLL) (11q23) BCR/ABL1 (22q11/9q34) Akute myelische Leukämie (AML) - Chrmsmenanalyse EGR1/RPS14 (5q31/5q32-33) 7cen/KMT2E/MET (7cen/7q22/7q31) KMT2A (früher MLL) (11q23) CBFB/MYH11 (16p13/16q22) TP53/NF1 (17p13/17q11) PML/RARA (15q24/17q21) RUNX1T1/RUNX1 (8q21/21q22) Variante M4 EO zusätzlich: FIP1L1/CHIC2/PDGFRA (4q12) PDGFRB (5q32-q33) FGFR1 (8p11) Myeldysplastisches Syndrm (MDS) - Chrmsmenanalyse EGR1/RPS14 (5q31/5q32-33) 7cen/KMT2E/MET (7cen/7q22/7q31) PTPRT/20qter (20q12/20qter) 8cen (8cen) Chrnisch myelmnzytäre Leukämie (CMML) - Chrmsmenanalyse 8cen (8cen) 7cen/KMT2E/MET (7cen/7q22/7q31) BCR/ABL1 (22q11/9q34) Seite 9 vn 12

11 mit Esinphilie Zusätzlich : FIP1L1/CHIC2/PDGFRA (4q12) PDGFRB (5q32-q33) FGFR1 (8p11) Myelprliferative Neplasien (MPN) - Chrmsmenanalyse PTPRT/20qter (20q12/20qter) 8cen (8cen) DLEU/LAMP (13q14/13q34) BCR/ABL1 (22q11/9q34) CDKN2C/CKS1B (1p32/ 1q21) Chrnisch myelische Leukämie (CML) - Chrmsmenanalyse BCR/ABL1 (22q11/9q34) Atypische CML (BCR/ABL1 negativ) - Chrmsmenanalyse - FISH : PTPRT/20qter (20q12/20qter) 8cen (8cen) DLEU/LAMP (13q14/13q34) BCR/ABL1 (22q11/9q34) CDKN2C/CKS1B (1p32/ 1q21) Myelische und lymphatische Neplasien mit Esinphilie und PDGFRA, PDGFRB- der FGFR1-Rearrangement - Chrmsmenanalyse FIP1L1/CHIC2/PDGFRA (4q12/4q12) PDGFRB (5q32-q33) FGFR1 (8p11) 4.2 B-Zell Nn-Hdgkin-Lymphme: B-NHL hne weitere Spezifikatin, Fllikuläres Lymphm (FL), Diffus grßzelliges B-Zell- Lymphm (DLBCL) - Chrmsmenanalyse IGH/MYC (14q32/8q24) IGH/BCL2 (14q32/18q21) BCL6 (3q27-28) Seite 10 vn 12

12 4.2.2 Burkitt-Lymphm (BL), Marginalznen-Lymphme (MZL, ndales MZL, SMZL, MALT) - Chrmsmenanalyse IGH/MYC (14q32/8q24) IGH/BCL2 (14q32/18q21) Chrnisch lymphatische Leukämie (CLL) Mantelzelllymphm (MCL), Mnklnale B-Zell-Lymphzytse (MBL) - Chrmsmenanalyse ATM/TP53 (11q22/17p13) DLEU/LAMP/12cen (13q14/13q34/12cen) SEC63/MYB (6q21/ 6q23) IGH/CCND1 (14q32/11q13) Immunzytm / Lymphplasmzytisches Lymphm (LPL), Mrbus Waldenström - Chrmsmenanalyse ATM/TP53 (11q22/17p13) SEC63/MYB (6q21/6q23) DLEU/LAMP (13q14 /13q34) IGH/MYC (14q32/8q24) IGH/FGFR3 (14q32/4p16) 4.3 Mnklnale Gammpathie, Mnklnale Gammpathie unklarer Signifikanz (MGUS), Multiples Myelm (MM) / Plasmzytm / Plasmazellleukämie - FISH nach CD138+ Anreicherung: CDKN2C/CKS1B (1p32/1q21) DLEU/TP53 (13q14 /17p13) 11cen (11cen) 3cen (3cen) EGR1/RPS14 (5q31/5q32-33) IGH (14q32) bei IGH-Rearrangement zusätzlich: IGH/CCND1 (14q32/11q13) IGH/MYC (14q32/8q24) IGH/MAF (14q32 /16q23) IGH/FGFR3 (14q32 /4p16) Seite 11 vn 12

13 4.4 T-Zell Nn-Hdgkin-Lymphme T-NHL hne weitere Spezifikatin T-Prlymphzyten-Leukämie (T-PLL) ATM/TP53 (11q22/17p13) SEC63/MYB (6q21/6q23) IGH/MYC (14q32/8q24) TCRA/D (14q11) 4.5 Material: - Knchenmark (Heparin I.E./ml) - Peripheres Blut (Heparin I.E./ml) Angaben zur Messunsicherheit stehen auf Anfrage zur Verfügung. *nicht akkreditierte Parameter Seite 12 vn 12

14 In Kperatin mit