spitäler schaffhausen Dr. R. Savoca Laborleiter Zentrallabor Spitäler Schaffhausen PRÄANALYTIK, Folie Nr. 1, Dr.R.Savoca spitäler schaffhausen

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1 Präanalytik Dr. R. Savoca Laborleiter Zentrallabor Spitäler Schaffhausen PRÄANALYTIK, Folie Nr. 1, Dr.R.Savoca Definition Mit dem Begriff Präanalytik werden alle Prozesse zusammengefasst welche vor der eigentlichen Analyse ablaufen. Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 2, Dr.R.Savoca

2 Ist Präanalytik in Zukunft überhaupt noch relevant? Genomics Proteomics Metabolomics Lipidomics Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 3, Dr.R.Savoca Preanalytic influence of sample handling on SELDI-TOF serum protein profiles Resultate: Längerer Transport und Inkubation bei RT verursachte tiefe Massenpeaks und somit Unterschiede unter den Protokollen. Die striktesten und am wenigsten strikten Methoden ergaben die tiefsten Peakvarianzen ein Hinweis dass die Proteolyse bei letzteren fast abgeschlossen war. Wenn Proben auf Eis transportiert wurden, gab es wenige Einflüsse der Lagermethode, Gerinnungszeit etc. Gewisse Proteine (TTR, ApoCI, und Transferrin) waren unbeeinflusst durch die Handhabung, aber andere (ITIH4 und Hämoglobin beta) zeigten signifikante Variabilität. Clin Chem Apr;53(4): Epub 2007 Feb 15 Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 4, Dr.R.Savoca

3 Preanalytical aspects and sample quality assessment in metabolomics studies of human blood METHODEN: Systematische Untersuchung von Röhrchentypen, Hämolyse, Temperatur und Zeit vor der Untersuchung bei metabolomischen Studien von Blut und Plasmaproben mit LC-MS RESULTATE: Serum-und Heparinröhrchen führten zu chem. Rauschen in den Massenspektren. Deutliche signifikante Änderungen an 64 Eigenschaften im EDTA-Plasma- Metabolom wurden gesehen wenn Blut bei RT für 2, 4, 8, und 24 h gelagert wurde... Das Plasma-Metabolom war bis 4 h stabil in EDTA Röhrchen, die sofort auf Eiswasser gelagert wurden. Hämolyse verursachte ebenfalls vielfache Änderungen im Metabolom Clin Chem May;59(5): Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 5, Dr.R.Savoca Welcher Anteil von falschen Resultaten beruht effektiv auf Laborfehlern? 1-2 % % % % Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 6, Dr.R.Savoca

4 Welcher Anteil von falschen Resultaten sind effektiv Laborfehler? % M.Plebani and P.Carraro, Clin.Chem. 43: (1997) Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 7, Dr.R.Savoca R.Savoca Blutentnahmen für Transfusionsabklärungen Seven hundred and fifty-nine (759) chances to learn: a 3-year pilot project to analyse transfusion-related near-miss events in the Republic of Ireland. Sample collection was found to be the highest risk step in the work process and was the first site of error in 468 (62%) events. D.Lundy et al. Vox Sang Mar;92(3): Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 8, Dr.R.Savoca

5 Häufigste präanalytische Fehlerquellen Zu lange Aufbewahrung der Proben Probenröhrchen ungenügend gefüllt Patient nicht nüchtern Interferenzen in der Probe Patientenverwechslungen Blutentnahme nicht lege artis (Stauung, Entnahme aus Infusionszugängen) Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 9, Dr.R.Savoca Zu lange Aufbewahrung der Proben Probenröhrchen ungenügend gefüllt Patient nicht nüchtern Interferenzen in der Probe Blutentnahme nicht lege artis Patientenverwechslungen Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 10, Dr.R.Savoca

6 Aufbewahrungsdauer (unzentrifugiertes Vollblut) Natrium Kalium Chlorid Phosphat Glucose ASAT LDH CK Bili Crea 1. Messung Mess. 24h Natrium Kalium Chlorid Phosphat Glucose ASAT LDH CK Bili Crea 1. Messung Mess. 24h Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 11, Dr.R.Savoca Aufbewahrungsdauer: Blutgase mit/ohne Luft in der Spritze ph arteriell po2 arteriell pco2 arteriell ph ohne ph 0.5 pco2 ohne po2 ohne ph 1.0 pco2 0.5pO2 0.5 pco2 1.0 po2 1.0 Sofort 10 min 20 min 50 min Sofort 10 min 20 min 50 min Sofort 10 min 20 min 50 min Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 12, Dr.R.Savoca

7 Aufbewahrungsdauer: Folat im Serum Folat Einzelwerte Vollblut bei Raumtemperatur Prozentuale Änderung im Vergleich zum Ursprungswert 80.0% 60.0% 40.0% 20.0% 0.0% -20.0% -40.0% Zeit (h) Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 13, Dr.R.Savoca Zu lange Aufbewahrung der Proben Probenröhrchen ungenügend gefüllt Patient nicht nüchtern Interferenzen in der Probe Patientenverwechslungen Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 14, Dr.R.Savoca

8 Ungenügend gefüllte Citratröhrchen Röhrchen Quick % aptt Fibrinogen Thrombinzeit Voll 103 % 30 s 3.6 g/l 15.9 s NICHT voll 62 % 43 s 2.2 g/l 21.1 s Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 15, Dr.R.Savoca Ungenügend gefüllte Citratröhrchen Einfluss des Füllvolumens von Citratröhrchen (2.5ml) bei Gesunden und Antikoagulierten (n=15) INR Füllvolumen (%) Adaptiert aus: Chuang et al. Chest 2004, 125; Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 16, Dr.R.Savoca

9 Füllung von Citratröhrchen und Hämatokrit Blutvolumen = Citratvolumen x 9 x (1-0.45)/(1-Hkt) Standardröhrchen (4.5 ml Blut, 0.5 ml Citrat) Hämatokrit Blutvolumen Akzeptable Füllung % % % % % Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 17, Dr.R.Savoca Zu lange Aufbewahrung der Proben Probenröhrchen ungenügend gefüllt Patient nicht nüchtern Interferenzen in der Probe Blutentnahme nicht lege artis Patientenverwechslungen Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 18, Dr.R.Savoca

10 Erhöhte Werte bei postprandialer Blutentnahme Glucose Triglyceride Bilirubin, AST Cholesterin ist postprandial NICHT signifikant erhöht! Ein Lipidstatus erfordert trotzdem einen nüchternen Probanden! Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 19, Dr.R.Savoca Blutentnahmen: Körperlage Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 20, Dr.R.Savoca

11 Zu lange Aufbewahrung der Proben Probenröhrchen ungenügend gefüllt Patient nicht nüchtern Interferenzen in der Probe Patientenverwechslungen Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 21, Dr.R.Savoca Interferenzen in der Probe Lipämie Ikterie Hämolyse Medikamente / Kontrastmittel Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 22, Dr.R.Savoca

12 Lipämie Verdünnung Ultrazentrifugation Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 23, Dr.R.Savoca Blutentnahmen Gründe für Hämolyse Zu lange Aufbewahrung von Vollblut Zu hohe oder zu tiefe Temperaturen Extreme mechanische Belastung Blutentnahme nicht lege artis - zu enge Kanülen - zu starke Stauung Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 24, Dr.R.Savoca

13 Auswirkungen von Hämolyse 08:00 (H:504) 08:45(H:8) Na mmol/l K mmol/l Harnstoff mmol/l Kreatinin umol/l LDH U/L AST U/L ALT U/L CK U/L Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 25, Dr.R.Savoca Prinzip der Serumindexmessung Lipämie: 660/700nm Ikterie: 480/505nm Hämolyse: 570/600nm Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 26, Dr.R.Savoca

14 Firmenangaben für Interferenzen Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 27, Dr.R.Savoca Limiten Hämolyseindex: Liste Schaffhausen Bemerkungsgrenze Löschgrenze Pank.Amyl ALP AST BilDir BilTot CK Eisen GGT Glucose K LDH Phosphat Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 28, Dr.R.Savoca

15 Bemerkung auf dem Befund Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 29, Dr.R.Savoca Notfallstationen und Hämolyse Bettenstationen: ca. 1-2 % ( > 50 mg/dl) Hämolyse NF-Station SH Notfallstation SH: 6.1 % (>50 mg/dl) Anzahl Proben Hämolyseindex (ug/dl) Hämolyseindex (mg/dl) Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 30, Dr.R.Savoca

16 Ursache der erhöhten Hämolyserate Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 31, Dr.R.Savoca Zu lange Aufbewahrung der Proben Probenröhrchen ungenügend gefüllt Patient nicht nüchtern Interferenzen in der Probe Patientenverwechslungen Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 32, Dr.R.Savoca

17 Patientenverwechslungen Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 33, Dr.R.Savoca Patientenverwechslungen Gegenmittel: Patientenarmbänder! Barcodiert oder mit RFID-Chip Vor der Blutentnahme: Scan von Röhrchen (Auftragsnummer) Patientennummer und ev. Mitarbeiternr. Uebertragung via WLAN und Check ob alles korrekt! Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 34, Dr.R.Savoca

18 Patientenverwechslungen 2 1. Wird beim richtigen Patienten (zur richtigen Zeit) Blut abgenommen? 2. Rückverfolgbarkeit: Wer hat wann genau welchem Patienten welche Probe abgenommen Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 35, Dr.R.Savoca Zusammenfassung In der präanalytischen Phase passieren mehr Fehler als in der Analytik Probeninterferenzen durch Lipämie, Ikterie und Hämolyse: Serumindex schnell objektiv und (fast) gratis Resultate sollten entsprechend kommentiert / gelöscht werden Patientenverwechslungen könnten mit technischen Mitteln grösstenteils vermieden werden! Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 36, Dr.R.Savoca

19 1. Präanalytischer Hauptsatz GIGO GARBAGE IN GARBAGE OUT Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 37, Dr.R.Savoca Spitäler Schaffhausen Präanalytik, Folie Nr. 38, Dr.R.Savoca