Der Einfluss von Vitamin D 3 auf endotheliale Reparaturprozesse im Zusammenhang mit der Präeklampsie

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1 Aus der Klinik für Frauenheilkunde und Geburtshilfe der Medizinischen Hochschule Hannover Der Einfluss von Vitamin D 3 auf endotheliale Reparaturprozesse im Zusammenhang mit der Präeklampsie Dissertation zur Erlangung des Doktorgrades der Medizin in der Medizinischen Hochschule Hannover Vorgelegt von Sarah Haß aus Kiel Hannover

2 Inhaltsverzeichnis Abbildungsverzeichnis Seite 1-2 Tabellenverzeichnis Seite 3 Einleitung Seite Plazenta Aufbau und Funktion der Plazenta Seite Präeklampsie Defintion und Symptomatik Seite 5-6 Epidemiologie Seite 6-7 Ätiologie Seite 7-9 Prävention und Therapie Seite Vaskulärer endothelialer Wachstumsfaktor (VEGF) Gliederung, Wirkmechanismus und Wirkung Seite VEGF und die Pathogenese von Erkrankungen Seite Endothelzellen (ECs) Differenzierung und Aufgaben der ECs Seite Vitamin D Vitamin D Stoffwechsel Seite 16 Wirkung und Funktion von Vitamin D Seite Vitamin D in physiologischer und präeklamptischer Seite Schwangerschaft 6. Fragestellung Seite 21

3 Material und Methoden Seite Chemikalien und Materialien Seite Geräte Seite Software Seite Auswahl der Probandinnen Seite Materialgewinnung Einwilligung Seite 28 Messungen der 25(OH) Vitamin D Serumkonzentrationen Seite Isolation der humanen umbilikalen venösen Endothelzellen (HUVECs) Seite Zellkultur Seite Mykoplasmentest Seite Charakterisierung der HUVECs mittels Durchflusszytometrie Seite Matrigel-Angiogenese-Assay Seite Proliferationsversuch Seite Migrationsversuch Seite Laktatdehydrogenase (LDH)-Assay Seite Ribonukleinsäure (RNA)-Isolation Seite RNA-Konzentrationsmessung Seite komplementäre Desoxyribonukleinsäure (cdna)-synthese Seite Echtzeit Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) zur Quantifizierung der VEGF-Genexpression Seite Statistische Auswertung Seite 46

4 Ergebnisse Seite Messungen der 25(OH) Vitamin D Serumkonzentrationen 2. Charakterisierung der HUVECs mittels Durchflusszytometrie Seite Seite Matrigel-Angiogenese-Assay Vergleich der in vitro Angiogenese von HUVECs aus gesunden und präeklamptischen Schwangerschaften Seite In vitro Angiogenese von HUVECs aus gesunden Behandlung Seite In vitro Angiogenese von HUVECs aus präeklamptischen Behandlung Seite Proliferationsversuch Vergleich der Proliferation von HUVECs aus gesunden und präeklamptischen Schwangerschaften Seite Proliferation von HUVECs aus gesunden Schwangerschaften unter l,25(oh)2 Vitamin D 3 Behandlung Seite Proliferation von HUVECs aus präeklamptischen Behandlung Seite Migrationsversuch Vergleich der Migration von HUVECs aus gesunden und präeklamptischen Schwangerschaften Seite Migration von HUVECs aus gesunden Schwangerschaften unter l,25(oh) z Vitamin D 3"Behandlung Seite Migration von HUVECs aus präeklamptischen Behandlung Seite LDH-Assay Seite RT-PCR zur Quantifizierung der VEGF-Genexpression Vergleich der VEGF-Genexpression der HUVECs aus gesunden und präeklamptischen Schwangerschaften Seite 76-77

5 VEGF-Genexpression von HUVECs aus gesunden Behandlung Seite VEGF-Genexpression von HUVECs aus präeklamptischen Behandlung Seite Diskussion Seite Hintergrund der Arbeit Seite Messungen der 25(OH) Vitamin D Serumkonzentrationen Seite Reinheit der Zellen Seite In vitro Angiogenese Seite Proliferation Seite Migration Seite VEGF-Genexpression Seite PE vs. Hypoxie Seite Unterschiedliche Wirkung von Vitamin D auf die angiogenetischen Eigenschaften von ECs, abhängig vom Differenzierungsgrad, der Abstammung und der Lokalisation der ECs Seite Zusammenfassung und Ausblick Seite Referenzen Seite Lebenslauf Seite 115 Erklärung nach 2 Abs. 2 Nr. 6 und 7 PromO Seite 117 Danksagung Seite 119

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