Andreas Gleixner. Pharmakologische Untersuchungen zur Anreicherung von Clenbuterol und steroidalen Anabolika in pigmentierten Geweben

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Astrid Gehrig
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1 Andreas Gleixner Pharmakologische Untersuchungen zur Anreicherung von Clenbuterol und steroidalen Anabolika in pigmentierten Geweben Herbert Utz Verlag Wissenschaft München 1996

2 Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis*«. *..... > 3 Abkürzuncsverzeichnis* * *» * * *» * ** «9 1. Einleitung und Aufgabenstellung Hormonelle Leistungsförderer ß-Agonisten, insbesondere Clenbuterol Steroidale Anabolika Gesetzliche Situation Rückstandsanalytik Clenbuterol Haaranalyse Steroidale Anabolika " Ausscheidungshemmer" Methoden und Materialien Versuchsbeschreibungen, Validierung der Extraktionsmelhoden Clenbuterolriickstände In den Augen von Mastkälbern nach Clenbuterolbehandlung..«..»» Tiere, Clenbuterolapplikation, Blutproben und Wartezeit Extraktion des Blutplasmas Präparation und Extraktion der Augen Validierung der Extraktionen Anreicherung von Clenbuterol in Kälberhaaren unterschiedlicher Pigmentierung Tiere Haarproben Vorbereitung der Haarproben Extraktion von Clenbuterol aus den Haaren Validierung der Extraktion J Nachweis von Clenbuterol in menschlichem Kopfhaar Haarproben 29

3 Probanden Vorbereitung der Haarproben Extraktion von Clenbuterol aus den Haaren Validierung der Extraktion Einfluß von Wasserstoffperoxid auf den meßbaren Clenbuterolgehalt in den Haaren Anreicherung von Ethinylöstradiol und Methyltestosteron in Kälberhaaren unterschiedlicher Pigmentierung Tiere Haarproben Vorbereitung der Haarproben Extraktion von Ethinylöstradiol und Methyltestosteron aus den Haaren und Reinigung der Extrakte Flüssig-Flüssig-Extraktion Festphasenextraktion (SPE) Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) Extraktion von Ethinylöstradiol und Methyltestosteron aus Blutplasma Validierung der Extraktionen Nachweis von Östradiol und Testosteron in Rinderhaaren Tiere Haarproben Vorbereitung der Haarproben Extraktion von östradiol und Testosteron aus den Haaren Validierung der Extraktion Nachweis von östradiol, Testosteron, Ethinylöstradiol und Norethindron in menschlichem Kopfhaar Haarproben Probanden Vorbereitung der Haarproben Extraktion der Steroide aus den Haaren Validierung der Extraktion Einfluß von "Ausscheidungshemmern" auf die urinäre Ausscheidung von Clenbuterol, Ethinylöstradiol und Methvltestosteron. ~ 39 Versuchsaufbau Tierexperiment 1: Urinstichproben 39 Versuchsaufbau Tierexperiment 2: 24-h-Urin 40 Extraktion von Clenbuterol, Ethinylöstradiol und Methyltestosteron aus Urin und Blutplasma 42 Validierung der Extraktionen 43 Statistische Auswertung.' 44 Ilormonmessungen Enzymimmuntest (EIA). 44 Clenbuterol (Clen) 44 Ethinylöstradiol (EEj) 44 Methyltestosteron (MT) 45 östradiol (Ej) 45 Testosteron (T) 46 Norethindron (NE) 46 Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) 46 Clenbuterol 46 EEj, MT, E* T und NE 47 Materialien und Geräte 47 Materialien 47 Geräte 49 Clenbuterolrflckstände in den Augen von Mastkälbern nach Clen buterolbehandlung Konzentrationen von Clenbuterol im Blutplasma 51 Clenbuterolrückstfinde in den Augen 53 Anreicherung von Clenbuterol in Kälberhaaren unterschiedlicher Pigmentierung....»...»>......««..... « « Konzentrationen von Clenbuterol im Blutplasma 55 Anreicherung von Clenbuterol in "Althaaren" 56

4 3.2.3 Zeitlicher Zusammenhang zwischen der Applikation von Clenbuterol und dem Nachweis in den Haaren Zusammenhang zwischen der Anreicherung von Clenbuterol in den Haaren und der Haarfarbe Bestätigung der Werte aus dem Enzymimmuntest Nachweis von Clenbuterol in menschlichem Kopfhaar Anreicherung von Clenbuterol in menschlichem Kopfhaar Sequentielle Analyse von Haarabschnitten Dauer der Nachweisbarkeit von Clenbuterol in menschlichem Kopfhaar Einfluß von Wasserstoffperoxid auf den Clenbuterolgehalt von Haaren Bestätigung der Werte aus dem Enzymimmuntest Anreicherung von EE 2 und MT in Kälberhaaren unterschiedlicher Pigmentierung Konzentrationen von EEj und MT im Blutplasma Anreicherung von EEj und MT in Kälberhaaren Zusammenhang zwischen der Anreicherung von EEj und MT in den Haaren und der Haarfarbe Nachweis von E, und T in Rinderhaaren Nachweis von Ej, T, EE, und NE in menschlichem KoDfhaar...»... « Auswirkung von "Ausscheidungshemmern" auf die urinäre Ausscheidung von Clenbuterol, EE 2 und MT Konzentrationen von Clenbuterol im Plasma der drei weiblichen Kälber aus dem Tierexperiment Konzentrationen von Clenbuterol in Urinstichproben der drei weiblichen Kälber aus Tierexperiment Konzentrationen von Clen, EEj und MT im Plasma der sechs männlichen Kälber aus dem Tierexperiment Ausscheidung von Clen, EEj und MT im 24-h-Urin der sechs männlichen Kälber aus Tierexperiment Bestätigung der Werte aus dem Enzymimmuntest Diskussion Clenbuterolrflckstände in den Augen von Mastkälbern nach Clenbuterol behandlung Anreicherung von Clenbuterol in verschieden pigmentierten Kälberhaaren Extraktion von Clenbuterol aus den Haaren Bestätigung der Werte aus dem Enzymimmuntest Pharmakokinetik von Clenbuterol und Anreicherung in den Haaren Zusammenhang zwischen der Anreicherung von Clenbuterol in den Haaren und der Haarfarbe Toxikologie und Rückstandsanalyse Nachweis von Clenbuterol in menschlichem Kopfhaar Extraktion von Clenbuterol aus den Haaren Bestätigung der Werte aus dem Enzymimmuntest Anreicherung von Clenbuterol in menschlichem Kopfhaar Sequentielle Analyse von Haarproben Bedeutung der Haaranalyse für die Dopingkontrolle Einfluß von Wasserstoffperoxid auf den Clenbuterolgehalt von Haaren Zusammenhang zwischen der Anreicherung von Clenbuterol in den Haaren und der Haarfarbe Anreicherung von EE, und MT in Kälberhaaren unterschiedlicher Pigmentierung Extraktion von EEj und MT aus den Haaren Anreicherung von EEj und MT in Kälberhaaren Vergleich der Anreicherung von EEj und MT mit der Anreicherung von Clenbuterol in Kälberhaaren Zusammenhang zwischen der Anreicherung von EEj und MT in den Haaren und der Haarfarbe 99

5 4.5 Nachweis von E 2 und T in Rinderhaaren Extraktion von Ej und T aus den Haaren Nachweis von Ej und T in Rinderhaaren Zusammenhang zwischen den Konzentrationen von Ej und T in den Haaren und im Plasma Zusammenhang zwischen den Konzentrationen von Ej und T in den Haaren und dem Alter bzw. dem Geschlecht der Rinder Nachweis von E T, EE 2 und NE in menschlichem Kopfhaar Extraktion der Steroide aus den Haaren Zusammenhang zwischen den Konzentrationen der Steroide in den Haaren und im Plasma Zusammenhang zwischen den Konzentrationen der Steroide in den Haaren und dem Alter bzw. dem Geschlecht der Probanden Nachweis der xenobiotischen Steroide EB 2 und NE in menschlichem Kopfhaar Bedeutung der Haaranalyse für die Dopingkontrolle Zusammenhang zwischen der Anreicherung der Steroide in den Haaren und der Haarfarbe Auswirkung von "Ausscheidungshemmern" auf die urinäre Ausscheidung von Clenbuterol, EE 2 und MT Bestätigung der Werte aus dem Enzymimmuntest Bedeutung von "Ausscheidungshemmern" für die Messungen von Clenbuterol, EE 2 und MT im Urin Abschlußdiskussion 107 Zusammenfassung 111 Summarv "*" """ J»..»...».». » «...«.»..»»»..»..»»..»..»......»».» ».....»..."» "."..»».«»w Literaturverzeichnis*...** * * Verzeichnis der Tabellen und Abbildungen 127 Danksagung 130 Lebenslauf. 131

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